负压屏障设施实验动物兽医的职责*

鹿双双 李晓燕 荣 蓉 师晓萌 卢选成*

负压屏障设施实验动物兽医的职责*

鹿双双①李晓燕①荣 蓉①师晓萌①卢选成①*

目的：阐述在负压屏障设施工作中实验动物兽医的职责。方法：文献评阅实验动物兽医相关的文献和资料，结合实际工作经验，对负压屏障设施内实验动物兽医的职责提炼总结。结果：通过参考有关文献关于实验动物兽医职责的论述，对负压屏障设施实验动物兽医的职责进行归纳总结。结论：循证研究负压屏障设施实验动物兽医的职责，可为负压屏障设施的管理提供参考。

负压屏障设施；实验动物兽医；职责

［First-author’s address］ Chinese Center for Disease Control and Prevention， Beijing 102206，China.

美国“实验动物管理和使用指南”（Animals，Guide，1996）［1］中实验动物兽医是指具有兽医学位且由认证获得相应资质、或有相应实验动物科学或者相关实验动物种系的培训或工作经验的兽医［2］。实验动物兽医是具有兽医资质且从事实验动物管理、繁育、疾病诊断防治以及动物试验和研究的人员，通常实验动物兽医是指实验动物临床兽医或实验动物主管兽医［3］。

1 实验动物兽医职责

各国对实验动物兽医职责的描述都有一定的法律法规。根据“实验动物管理和使用指南”以及实验动物管理和使用委员会（institutional animal care use Committee，IACUC）［4］中对兽医职责的描述，实验动物兽医的职责包括：①参与动物有关研究项目的审核；②动物的购买和运输；③预防医学，包括动物隔离检疫、隔离以及监控、诊断、治疗和控制疾病；④处理实验相关的疾病或后遗症；⑤动物福利的评价；⑥恰当的手术和术后护理，包括适当的镇痛和麻醉；⑦安乐死［5］。

2 负压屏障设施的特点

2.1 屏障环境

按照空气净化的控制程度，实验动物环境分为普通环境、屏障环境和隔离环境［6］。屏障环境适用于饲育清洁级实验动物及无特定病原体级实验动物。屏障环境分为正压和负压两种［7］。正压环境的动物实验室适合饲养生产各种实验动物以及进行非感染动物实验（如药物安全评价、各种免疫实验等普通实验）；而负压环境的动物实验室则适合于非烈性传染病的感染动物实验［8］。

2.2 屏障设施

独立通风笼盒系统（individual ventilated cages，IVC）广泛应用于啮齿类实验动物的实验，在屏障设施内IVC更是得到广泛的应用［9］。将感染的啮齿类实验动物饲养在负压屏障设施的负压IVC内是为了防止感染性动物实验对环境造成污染以及防止人与实验动物交叉感染，同时使动物实验的结果更准确和可信。其他种类的负压隔离器，如犬猴负压饲养柜、鸡负压隔离器以及兔负压饲养柜等分别用于犬猴、鸡和兔等的感染性实验［10-12］。动物负压隔离器即具有独立的送排风装置，在负压屏障设施内使用负压隔离器能有效的防止环境、动物与人员之间的交叉感染［13］。

2.3 负压屏障设施

负压屏障设施的饲养间的压力最小，这样“污染源”就集中在饲养间。饲养间内使用负压饲养设备，设备是屋内采风，排风经初、中、高效过滤后排到室外环境的空气中。负压屏障设施制定了一系列的规章制度和标准操作规程（standard operation procedures，SOP），以此规范工作人员和实验人员的操作。每年根据需要修订或者新增相关的SOP，以适应负压屏障设施的发展。

3 负压屏障设施存在的问题

随着国内实验动物行业的发展，实验动物的管理等方面也逐渐和国际接轨。1988年国家科学技术委员会第2号令发布施行了“实验动物管理条例”，2006年科技部发布了“关于善待实验动物的指导性意见”［14-15］。近十余年，各相关部门又相继出台了一些指导意见等，实验动物享有五大“福利”：①生理福利，即无饥渴之忧虑；②环境福利，即让动物有适当的居所；③卫生福利，主要是减少动物的伤病；④行为福利，应保证动物表达天性的自由；⑤心理福利，即减少动物恐惧和焦虑的心情。

3.1 环境丰富度欠缺

按照实验动物福利的要求，饲养在负压屏障设施内的实验动物应设置玩具供其玩耍以满足其表达天性的自由。由于负压屏障设施内大多数实验都是感染性动物实验，各实验之间病原微生物的种类也不尽相同，为避免交叉污染，负压屏障区内未放置玩具。因此，负压屏障区在兼顾环境丰富度和生物安全方面可能有所欠缺。

3.2 负压屏障设施监管不利存在的问题

（1）实验人员经紫外线传递窗传递实验用品时不规范。不填写“传递窗传入记录表”、传入实验用品时不打开包装袋以及某些实验用品未经紫外线照射20 min即取出在屏障区内使用

（2）实验过程中的交叉污染问题。在做感染性实验的饲养间内擅自打开IVC笼盒，在做完感染性实验后进入其他进行感染性实验的饲养间，造成有些经气溶胶传播的病原微生物相互之间的交叉污染，给实验结果带来不确定性。

（3）饲养过程中的问题。有时饲养人员更换IVC笼盒时未将IVC笼盒复位，IVC笼盒内微环境的温湿度会相应变化，不同等级的实验动物饲养在同一饲养间内。

（4）负压屏障设施本身的问题。负压屏障设施内湿度不恒定，受外界天气影响较大，IVC笼盒内微环境的湿度也会因此受到影响。

（5）实验过程中涉及到的福利伦理问题。有些实验中IVC笼盒内饲养密度偏大，动物的有效活动空间变小，实验过程中动物数量不断增加或者时间不断延长。

（6）实验动物传出负压屏障设施涉及的生物安全问题。有些实验人员需要将感染后的实验动物传出负压屏障设施进行后续的实验，若带到更高级别的实验室进行实验则不涉及生物安全，但如在普通实验室进行解剖或者取样则涉及生物安全问题。此外，实验人员若不按规定包装，在运输过程中会涉及到生物安全问题。

4 负压屏障环境的实验动物兽医主要职责

在负压屏障环境中遇到的一些问题不仅给屏障设施的运行管理带来了麻烦，也违背了实验动物福利伦理的要求，而实验动物兽医的职责主要是保障实验动物的健康和福利，以确保实验的顺利进行。

（1）完善防疫相关的规章制度、工作计划及标准操作规程和实验人员上岗前的培训等。为规范进出负压屏障环境人员的活动及行为，兽医需要起草及制定相应的规章制度和标准操作规程（standard operation procedures，SOP）。如实验动物的接收与检疫、兽医检查、采血、外科手术、疾病控制、麻醉及安乐死以及濒死或死亡动物的处理等规程。凡是进入负压屏障设施的人员，包括工作人员和实验人员都应严格遵循SOP以杜绝疾病的引入和传播。实验人员进入负压屏障设施前，兽医需要对其进行岗前培训，以便实验人员了解和掌握进入负压屏障设施的操作规程和注意事项等。

（2）实验动物的健康和福利伦理工作。在接收实验动物实验申请时要经过福利伦理委员会的审核，审核中由兽医给实验提供建议，可监督检查实验人员在实验操作过程中是否有违背福利伦理的行为。实验方案中如涉及实验动物手术的步骤，在手术后兽医需要提供及时的术后护理，使实验动物更快康复。由于负压屏障设施内多为感染性实验，因此在感染性实验后期，如动物遭受巨大痛苦，在不影响实验结果的前提下，经实验负责人同意后，可对该动物进行安乐死。实验结束后（非人灵长类除外）实验动物需要进行安乐死。

（3）感染性实验的风险评估。负压屏障设施内的实验多数为感染性实验，涉及的病原微生物比较复杂，因此在进行动物实验前应对其进行风险评估，其中包括病原微生物的种类、致病性、传播途径、感染后的潜伏期、临床症状、诊断治疗措施、如何有效消毒和预防以及病原微生物的动物感染实验是否与“人间传染的病原微生物名录”的要求相一致等。评估后，兽医出具“风险评估报告”，并对内部工作人员进行培训，确保工作人员在工作过程中避免感染相应的病原微生物。

（4）实验动物进出设施的检疫相关工作。实验动物进出负压屏障设施需填写相应表格进行记录。实验动物进入设施前应检查动物的包装运输盒是否与订购动物的等级相符合以及运输盒是否完整。实验动物传入设施后应检查动物的数量、性别、品种及品系等是否与包装运输单和质量合格证上的信息一致，并检查实验动物的被毛、皮肤以及精神状态。实验期间或者实验结束后死亡动物需要装入高压灭菌袋内，经双扉高压锅高压灭菌后从负压屏障设施中传出，以免已感染病原微生物的实验动物污染环境，高压后的实验动物由相应的机构统一处理。如果实验人员需要在实验期间将实验动物运至更高级别的实验室进行后续实验，需经实验动物兽医或者负压设施负责人同意，并填写“实验动物传出记录表”；实验动物转移至IVC笼盒内并经过严格的生物安全包装后，再运输到更高级别的实验室。

（5）实验动物疾病的监测、预防、初步诊断及治疗工作。新进入负压屏障设施的实验动物需先经兽医检查无明显异常后进行隔离检疫，在隔离期内兽医应密切关注实验动物的状态，以免新进动物处于某些疾病的潜伏期。在隔离期内发现如动物有异常死亡等现象应分析原因后采取相应的措施，如果由于动物处于某种疾病的潜伏期导致，应将此批次的动物一起退回；如果由于动物个体差异导致则继续进行隔离观察。经过隔离期后进入负压设施的实验动物与同设施内已有的动物一起饲养。在正常饲养期内，饲养人员一旦发现实验动物有异常情况需要立即向兽医汇报，以便兽医及时处理。负压屏障实验动物兽医应区分实验动物的异常情况是否是由感染的病原微生物所导致，如其异常情况不为实验预期结果，兽医则需要与实验人员商议确定解决方案。此外，兽医应定期抽查实验动物的健康状况。

（6）监督、检查动物设施的饲养管理及卫生条件。实验动物兽医在负压屏障设施内，尤其在某些特殊的感染性实验中，应指导饲养人员如何正确饲养实验动物。实验动物兽医要定期检查负压屏障设施的卫生状况以使其达到动物福利和国标要求。

（7）负责麻醉、安定及镇痛类药品的采购及使用管理。根据IACUC对兽医的要求，实验动物兽医应负责麻醉品等药物的采购和使用，负压屏障设施内麻醉药、镇痛药等药品的使用必须经兽医同意，并在其监督下使用。兽医应定期对麻醉品等药物查看，如发现有过期的麻醉品则需要经专门的机构处理。

（8）根据负压屏障设施的特点，及时对实验动物兽医的知识进行更新。作为实验动物兽医应及时了解实验动物最新动态消息，为负压屏障设施内各种实验平台的建立提供相应的理论和技术支持。实验动物兽医每年要定期进行培训，确保知识不断的更新，为实验提供更好的服务。

5 结语

实验动物中心若获得国际实验动物评估和认证协会的认证，实验动物兽医对实验动物的医护和福利伦理的改善至关重要。实验动物兽医应积极改善实验动物的福利，如在小鼠独立通气笼盒（individual ventilated cages，IVC）内放置筑巢材料，在某些非感染性实验笼盒内放置耐高压的玩具等。实验动物兽医职责繁重而复杂，需要较高的理论和实践水平、科学素养和法律法规遵循理念［13］。实验动物兽医在负压屏障设施的工作中需要持之以恒的学习，在更好的善待实验动物的同时为科研人员提供更优质的服务。

［1］Institute of Laboratory Animal Resources，Commission of Life Sciences，National Research Council.Guide for the care and use of laboratory animals［M］.Washington DC：National Academy Press，1996.

［2］师福山，庞万勇，杨秀进，等.动物实验中的兽医作用［J］.中国比较医学杂志，2011，21（10）：104-106.

［3］庞万勇.实验动物兽医职责与培养［C］.中国兽医发展论坛专题报告文集，2012：629-634.

［4］IACUC.Institutional Animal Care and Use Committee Guidebook［S］.IACUC，2002.

［5］王建飞，周燕，刘吉宏，等译.实验动物饲养管理和使用指南［M］.上海：上海科学技术出版社，2012.

［6］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局. GB14925-2010实验动物环境及设施［S］.中国国家标准化管理委员会，2010-12-23.

［7］中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局. GB50447-2008实验动物设施建筑技术规范［S］.中国国家标准化管理委员会，2008-08-13.

［8］施正良，饶江宁.关于医学实验动物负压实验室的建立与应用探讨研究［C］.全国人畜共患病学术研讨会论文集，2008：460-461.

［9］施正良，仲晓萍，饶江宁，等.IVC应用研究初报［J］.上海实验动物科学，2004，24（2）：109-110.

［10］吴福林，樊宝仁，程君生，等.正负压不锈钢隔离器的研制与使用［J］.中国兽药杂志，2002，36（3）：52-54.

［11］黑龙江省实验动物管理办公室.“SARS”研究-猴用负压隔离器研制获得重大进展［J］.畜牧兽医科技信息2003，19（6）：50.

［12］程水生.隔离器使用六要点［J］.农产品市场周刊，2004（23）：19-20.

［13］付傅文，王勇，汤宏斌.动物负压隔离器压板等机构装置的设计改型研究［C］.第五届中南地区实验动物科技交流会，2005：10-11.

［14］国家科学技术委员会.国家科学技术委员会令第2号实验动物管理条例［S］.国家科学技术委员会，1988.

［15］中华人民共和国科学技术部国科发财字［2006］398号关于发布《关于善待实验动物的指导性意见》的通知［S］.科学技术部，2006-9-30.

［16］沈智，庞万勇.浅谈实验动物兽医的职责及实践［J］.中国比较医学杂志，2010，20（6）：1-6.

Responsibilities of laboratory animal veterinarians in negative pressure barrier facilities

LU Shuang-shuang， LI Xiao-yan， RONG Rong， et al// China Medical Equipment，2016，13（4）：123-126.

Objective： To introduce the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility. Methods： To summarize the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility， on the basis of my own working experience and the articles describing responsibilities of laboratory animal veterinarians. Results： In literature review to the documents of laboratory animal veterinarians， clarified the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility. Conclusion： This article introduced the responsibilities of laboratory animal veterinarians working in the negative pressure barrier facility and supplied reference to administrators in the negative pressure barrier facility.

Negative pressure barrier facility； Laboratory animal veterinarian； Responsibilities

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.04.039

1672-8270（2016）04-0123-04

R-332

A

2015-05-18

卫生行业科研专项（201302006）“生物实验中的人畜共患病安全问题及其对策研究”

①中国疾病预防控制中心实验动物中心 北京 102206

*通讯作者：luxc@chinacdc.cn

鹿双双，女，（1989- ），硕士，研究实习员。中国疾病预防控制中心实验动物中心，研究方向： 实验动物兽医。