牛乳中大肠杆菌O157∶H7 PCR检测方法的建立

刘　鑫，姚　笛，郭　瑜，张　微，佐兆杭，侯婷婷

（黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆　163319）

牛乳中大肠杆菌O157∶H7 PCR检测方法的建立

刘鑫，姚笛，郭瑜，张微，佐兆杭，侯婷婷

（黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆163319）

为了建立牛乳中大肠杆菌O157∶H7的PCR快速检测方法，试验对大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因序列进行分析，设计1对特异性引物，对大肠杆菌O157∶H7的DNA进行PCR扩增，结合特异性和灵敏性试验，实现对致病性大肠杆菌O157∶H7的检测；然后将不同含量的大肠杆菌掺入到牛乳中进行实际样品的检测。结果表明，该方法的特异性和灵敏性较好，能够检测到0.1 ng/μL的DNA模板，当牛乳中含有超过100 CFU/mL的大肠杆菌时，可利用该方法进行检测。

大肠杆菌O157∶H7；PCR技术；检测

大肠杆菌O157∶H7是一种肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC） 的代表菌株，它是能够引起人的出血性腹泻和肠炎的一群大肠埃希氏菌［1］。大肠杆菌O157∶H7可产生大量毒素，从而引起出血性结肠炎等疾病［2］。自美国首次分离出该菌以后，O157∶H7的爆发和流行相继出现在全球五大洲的20多个国家［3］。目前，我国还未对由大肠杆菌O157∶H7引起的食物中毒进行比较系统的调查、分析和统计，但是从我国的饮食结构、食品加工、贮藏和运输条件等方面推测大肠杆菌O157∶H7的污染情况是比较严重的［4］。另外，大肠杆菌O157∶H7主要附着在人或动物的肠道内，可通过粪便等多种途径污染食品，为了保障食品的食用安全性，有必要对食品中的大肠杆菌O157∶H7进行快速检测。

目前，大肠杆菌O157∶H7的检测方法主要是常规的细菌学分离鉴定方法，该方法存在耗时长、过程复杂、灵敏性不强等缺点。……