Kartogenin与TGF⁃β3/BMP⁃2/DEX对兔滑膜间充质干细胞增殖及成软骨分化的对比研究

谢金硕 周义钦 陈松 邵加华 符培亮 许震宇 吴海山

Kartogenin与TGF⁃β3/BMP⁃2/DEX对兔滑膜间充质干细胞增殖及成软骨分化的对比研究

谢金硕 周义钦 陈松 邵加华 符培亮 许震宇 吴海山

目的 比较Kartogenin（KGN）与转化生长因子β3（TGF⁃β3）/骨形态发生蛋白2（BMP⁃2）/地塞米松（DEX）对兔滑膜间充质干细胞（synovial⁃derivedmesenchymal stem cells,SMSCs）增殖及成软骨分化的作用。方法 于6～10月龄新西兰大白兔膝关节处滑膜中分离培养SMSCs，并进行鉴定。设置KGN组（采用KGN干预）、T/B/D组（TGF⁃β3/BMP⁃2/DEX联合干预）及空白对照组，采用PELLET系统培养法分别培养各组细胞。通过比较各组细胞的增殖速度、软骨微球的直径和重量、Ⅱ型胶原（Col⁃Ⅱ）表达情况、成软骨分化相关标志基因表达及蛋白质合成量等指标来评价KGN对SMSCs增殖及成软骨能力的影响。结果 成功从兔膝关节滑膜分离出SMSCs；KGN组的SMSCs增殖能力弱于T/B/D组，但KGN组软骨微球直径最大，重量最重，Ⅱ型胶原合成量最多，且均显著高于其他组；PCR及Western Blot结果表明KGN组成软骨分化相关基因的表达最强，蛋白质合成量最多。结论 KGN不能明显增强SMSCs的增殖能力，但对SMSCs的成软骨分化能力强于TGF⁃β3/BMP⁃2/DEX，将来可能应用于修复软骨损伤。

滑膜；间质干细胞；细胞增殖；细胞分化；软骨细胞；转化生长因子

滑膜间充质干细胞（synovial⁃derivedmesenchy⁃ mal stem cells,SMSCs）是一种关节滑膜源性的组织特异性的间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）［1］，具有很强的成软骨分化能力［2］，而众多细胞因子参与这一过程并起到关键作用。多项研究报道，转化生长因子β3（transforming growth factor⁃β3, TGF⁃β3）、骨形态发生蛋白2（bonemorphogenetic protein⁃2,BMP⁃2）、地塞米松（dexamethasone,DEX）

是促肝细胞成软骨分化的常用因子，并且三者联合体外诱导SMSCs成软骨分化比单一因子或两两联合的诱导效率都要高［3⁃6］。……