气相色谱法快速分析人唾液中7种短链脂肪酸

赵晓亚+王跃飞+杨帆+江振作+王琰+杨龙+潘赞红

摘要 建立了气相色谱法（GC）同时检测人唾液中7种短链脂肪酸（Short-chain fatty acids， SCFAs）含量的方法。唾液样品与乙醇溶液按体积比1∶1混合（含0.5%（V/V）浓HCl） 涡旋混合，离心后取上清液进行GC分析。采用DB-FFAP毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）进行分离； 氢火焰离子化检测器（FID）进行检测，内标法定量。实验结果表明，唾液中共检测到7种SCFAs（乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸），7种SCFAs与内标物2-乙基丁酸的色谱峰峰面积比值与其浓度均呈现良好的线性关系（R2≥0.999），检出限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）分别为0.060～0.198 μg/mL和0.180～0.594 μg/mL，平均加样回收率为94.8%～109.7%（RSD≤4.3%）。本方法简单、快速、准确，可用于测定人的唾液中短链脂肪酸的含量。

关键词 气相色谱； 唾液； 短链脂肪酸； 肠道菌群

2015-12-05收稿； 2016-03-27接受

本文系重大新药创制科技重大专项项目（No.2015ZX09J15102-004-004）资助

E-mail： wangyuefei_2006@hotmail.com； jeny_pan@163.com

1 引 言

短链脂肪酸（Short-chain fatty acids，SCFAs）是由益生菌，主要是肠道厌氧益生菌发酵膳食纤维和部分氨基酸和蛋白质的终产物[1，2]，主要包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和己酸等。短链脂肪酸不仅能为机体细胞提供能量[3]，同时具有抑制致病菌[4，5]、抑制肠道上皮细胞和骨髓细胞的炎症反应[6]等作用，并可以调节机体代谢平衡，降低炎症性肠病、肥胖和II型糖尿病等疾病的发生率[7]。

肠腔内产生的短链脂肪酸，一部分在肠道中被利用，另一部分进入血液循环，通过细胞膜和粘膜的渗透作用进入唾液[8]，或经血液循环运输至肺部，并随呼吸作用到达口腔， 进入唾液[9]。唾液成分包括少量电解质、蛋白质、激素、DNA、RNA以及其它小分子物质。与血液和尿液等体液相比，唾液分析具有取样简单、适应性好、临床检验快速、简便等特点[10]，且基于唾液和血液物质的相关性[9，11]，临床上可用于多种疾病的诊断[12]。……