华重楼(Parispolyphylla Smith var. chinensis)无性繁殖试验研究

谷海燕，谢孔平

(1. 四川省自然资源科学研究院，四川 成都 610015；2. 峨嵋山生物资源实验站，四川 峨眉 614201)



华重楼(ParispolyphyllaSmith var.chinensis)无性繁殖试验研究

谷海燕1，2，谢孔平1,2

(1. 四川省自然资源科学研究院，四川 成都 610015；2. 峨嵋山生物资源实验站，四川 峨眉 614201)

华重楼为我国一味珍贵的民族药，本文以华重楼根茎为材料开展其无性繁殖试验，研究植物生长调节剂6-BA不同浓度对其潜伏芽萌发、生长的影响。试验结果显示5mg/L的6-BA可促进华重楼切段的繁殖系数，提高其双芽率、多芽率及有根率。

华重楼；根茎；无性繁殖

华重楼为延龄草科重楼属的多年生草本植物，是我国一味珍贵的民族药，具有非常悠久的药用历史[1]，常用于毒蛇咬伤、乳腺炎、跌打伤痛等病症的治疗[2-5]，是夺命丹、云南白药、四川抗病毒冲剂、宫血宁及其他中成药的重要原料。2005年版和2010年版的《中国药典》中均规定华重楼ParispolyphyllaSmith var.chinensisHara与滇重楼ParispolyphyllaSmith var.yunanensis的干燥根茎为重楼的正品药源[6-7]。近年来的医学研究表明，华重楼对多种癌症具有良好的疗效，临床上用于医治肝癌、胃癌和白血病等[8-9]。另外，在我国的一些地方，华重楼是治疗蛇伤应用最为广泛的草药之一，一般的蛇药配方中也少不了它。

目前我国华重楼药用原料主要来自于野生，造成野生储存量急剧减少，而华重楼为多年生草本植物，生长缓慢，即使现在加强资源保护，其种群在近些年也难以恢复。解决重楼产业供求矛盾并保护野生资源最为有效的方式，就是大力发展重楼的规模化人工种植。

多年来，我国科研工作者通过各种手段开展重楼繁殖工作[10-20]。目前我国重楼产业中种苗繁育的一种方式为种子繁殖，由于重楼种子具有“二年休眠”、出苗率低的特性，影响了种子繁殖的效率，并且幼苗到成药周期长，对重楼种子进行处理提高其当年萌发率是目前科研工作者的研究内容；块茎繁殖是重楼繁育的另一个重要方式，这种方式操作方便，但存在块茎易染菌溃烂，萌发率低等问题。 本文通过切割华重楼块茎，采用外源生长调节剂6-BA的不同浓度处理，探寻其萌发率高、简便高效经济的方式，期望为我国重楼的产业化栽培提供有效建议。

1 研究内容和方法

1.1 试验材料

本试验的繁殖材料为华重楼的根状茎，这些材料经人工驯化，已生长有4～5 a的时间，直径为3～5 cm。11月底，在华重楼倒苗后，挖取其根茎，按垂直于其主轴的方向切割，每个切块至少保留一个茎节，长度在3～4 cm之间。

1.2 试验方法

2013年12月中旬，将华重楼的根状茎放入4g/L的多菌灵溶液中浸泡15 min，之后将其横切为2或3段，分为带顶芽的顶段及不带顶芽的中段、底段三个部位，每段至少有1个小节，保证每个切段的长度不小于2 cm。切段阴干后置于生长调节剂6-BA溶液(分别为2 mg/L、5 mg/L、8 mg/L)中浸泡2 h，另做CK做对比；随后切割伤口用草木灰处理，埋入峨眉山基地的试验田中，盖入一层5 cm左右厚的腐殖土，然后覆膜保温；2014年3月，峨眉山气温回升时，去除覆膜。

1.3 各指标的计算公式

出芽率=(萌发芽切断数/处理切段总数)×100%

切段损失率=(腐烂切段数/各处理切段总数)×100%

总有根率=(长出须根切段数/各处理切段总数)×100%

单芽率=(萌发1芽切段数/各处理切段总数)×100%

双芽率=(萌发2芽切段数/各处理切段总数)×100%

多芽率=(萌发多于2芽切段数/各处理切段总数)×100%

繁殖系数=萌发芽数/各处理切段总数

2 研究结果和分析

2015年5月底，统计生长了一年半的华重楼根茎切段生长情况，对试验结果进行多重比较。

2.1 不同部位切段损失率、发芽情况分析

经统计，本试验中试验材料总的切段损失率比较低，为7.2%，其中顶部切段损失率为零，损失的为中、下部的切段。在育苗时，中、下部切段的湿度、防染菌控制均是关键。

试验结果表明，顶部切段和中、下部切段，芽的萌发情况差异明显(见表1)，顶部切段出芽率达到100%，出苗率亦达到100%，而中、下部的出芽率为70%左右。试验观察发现，顶部切段是根茎中生命力最顽强的部分，在切割后3个月即可出苗，形成正常植株，并可当年开花结实，高度达到60～70 cm左右。试验中这些切段形成的地上茎虽然偶有双轴出现，但绝大多数为单轴。经2015年6月的统计表明，中、下部切段的出芽率为70.2%；中下部切段在2014年没有出苗现象，于2015年3月开始逐渐出苗，苗高多在5 cm左右，出苗率为50%左右。

试验中华重楼顶部切段、中下部切段的繁殖系数均不甚理想，中下部切段的繁殖系数高于顶部。经统计，顶部切段出芽率虽为100%，但几乎均为单芽，偶尔亦有双芽萌发，但出现几率极低，不到4%，其繁殖系数为1.04；而中下部切段虽然出芽率仅为70.2%，远低于顶部切段，但不仅有单芽、双芽，也会萌发出三芽、四芽，因此其繁殖系数为1.74，高于顶部切段。

表1 不同切割部位发芽情况

2.2 生长调节剂6-BA对切段萌芽、生长情况的影响

采用不同浓度的生长调节剂6-BA对切段进行处理，试验切段在经过一年半生长之后的情况见表2。试验结果表明，处理后切断的平均繁殖系数为1.55，其中5 mg/L的6-BA处理后切段繁殖系数最高，为2.3，与其他2个处理及对照均存在显著差异；经过2 mg/L的6-BA处理后，仅为0.93，甚至低于空白对照1.09；8 mg/L 6-BA处理下切段的繁殖系数为1.42。统计结果显示，华重楼的切割根状茎采用5 mg/L的生长调节剂6-BA处理后，能提高华重楼的繁殖系数。

表2数据显示，3个浓度的6-BA处理试验切段后，单芽率相比对照有所降低。2 mg/L 6-BA的处理，可能是试验操作失误的原因，造成其切段损失率高达15.1%，全为单芽萌发，无双芽和多芽萌发。另2个处理的双芽率均与对照存在差异，可见生长调节剂6-BA对华重楼切段萌芽具有一定的促进作用，尤其是在浓度为5 mg/L的6-BA处理下，多芽的萌发率高达15.6%。

本试验中顶端切段无损失，均在来年3月出苗，进行光合作用，因此顶端增重明显，其中以5 mg/L 6-BA处理的茎段增重最为明显，达到6.48 g。中低段虽然萌发芽数多，但增重状况则不理想，依然是5 mg/L 6-BA处理的茎段增重最多，为1.7 g。

表2 不同浓度生长调节剂6-BA对华重楼切段萌发的影响

注：大写字母表示1%水平的差异，小写字母表示5%水平的差异；相同字母表示差异不显著，不同字母表示差异显著。

3 结 论

在研究和实际生产中，往往存在着重楼切段大量腐烂的现象。通过试验表明，只要在栽植前采用多菌灵灭菌，并采用草木灰覆裹切段，保持土壤不过于湿润，就可以在一定程度上杜绝腐烂现象。另外，根据以往学者的研究，不带顶芽的切段年平均增重没有带顶芽的高，但形成顶芽的数量多可以不断切割扩繁，本试验结果与学者的研究结果相同。本试验中不带顶芽的切段年平均增重没有带顶芽的高，这应该是因为带顶芽的切段具有顶端优势，分生新芽的能力没有不带顶芽的切段强，当年即可形成正常植株，进行光合作用，增重显然要高。

5 mg/L的生长调节剂6-BA可在一定程度上促进华重楼切段的繁殖系数，提高其双多芽率、有根率等，超过或低于这个浓度则会起到抑制作用。

采用华重楼根茎切段繁殖，占用了大量的原材料，虽然种植周期比种子繁殖种植周期短3～4年，但栽植生长过程中会造成一定程度切段的损失，且繁殖系数不到2，不甚理想，另外出苗不整齐，管理不方便，造成种植的成本增加。

[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志：第15卷[M].北京：科学出版社，1959:92.

[2] 陈昌祥，张玉童. 滇产植物皂素成分的研究Ⅴ.滇重楼甾体皂素和β-蜕皮激素[J]. 云南植物研究，1981,3(1)：89.

[3] 郑慧丽，竺叶青. 七叶一枝花酊剂薄层层析及其薯蓣皂苷元定量[J]. 上海医科大学学报，1995,1(22)：65.

[4] 韦建荣. 高效液相色谱法测定重楼提取物中偏诺皂苷类成分的研究[J]. 药物分析杂志，1997,17(3)：153.

[5] 王强，徐国钧. 七叶一枝花类商品药材总皂苷含量测定[J]. 中药材，1989,12(7)：32.

[6] 国家药典委员会.中国药典: 一部[S]. 北京：化学工业出版社，2005:145.

[7] 国家药典委员会.中国药典: 一部[S]. 北京：中国医药科技出版社，2010.

[8] 季申，周坛树，张锦哲. 中药重楼和云南白药中抗肿瘤细胞毒活性物质Gracillin的测定[J].中成药，2001,23(2)：212.

[9] 许玲. 益肺肿瘤饮对肺癌转移及免疫功能的影响[J]. 中国中西医结合杂志，1997,17(7)：401.

[10] 熊海浪，易继财，张宗申. 滇重楼种子萌发及组织培养研究[J]. 广东农业科学，2011,21:47-49.

[11] 周浓，李自勤，姜北,等. 超声波对滇重楼种子萌发能力的影响[J]. 湖北农业科学，2012,51(1)：114-116.

[12] 刘艳梅. 滇重楼的种子繁殖技术[J]. 吉林农业，2011,10:147.

[13] 王艳芳，唐玲，李荣英,等. 影响滇重楼种子萌发及胚根生长因素的研究[J]. 云南中医学院学报，2012,35(2)：28-31.

[14] 陈疏影，尹品训，杨艳琼, 等. 变温层积对解除滇重楼种子休眠及内源激素变化的研究[J].中草药，2011，(4)：793-795.

[15] 宋发军，黄宗华. 七叶一枝花组织培养和种子萌发条件的研究[J]. 中南民族大学学报(自然科学版)，2013,32(2)：51-54.

[16] 陈翠，杨丽云，吕丽芬，等. 云南重楼根状茎切段苗繁育技术研究[J]. 西南农业学报，2007,20(4):706-710.

[17] 黄珊珊，杨平，班荔，等. ABT生根粉在七叶一枝花增产栽培中的应用试验[J]. 中国野生植物资源，2008,27(5)：70-71.

[18] 张金渝，虞泓，张时刚，等. 滇重楼与华重楼的野生驯化和繁殖技术研究[J]. 西南农业学报，2004,17(3)：314-317.

[19] 崔宝禄，唐德华，王兴贵. 重楼无性繁殖研究进展[J]. 河北林果研究，2009,24(4)：309-401.

[20] 李荣英，段立胜，唐德英. 重楼种苗繁殖试验[J]. 时珍国医国药，2006,17(12)：2639.

Studies on Asexual Propagation ofParispolyphyllaSmith var.chinensis

Gu Haiyan1,2,Xie Kongping1,2

(1. Sichuan Nature Resource Institute, Chengdu 610015,China;2. Emei Mountain Biotic Resource Experimental Station, Emei 614201,China)

ParispolyphyllaSmith var.chinensisHara is a rare ethnodrug. An experiment of asexual propagation ,based on rhizome ofParispolyphyllaSmith var.chinensisHara were arranged in order to study the effects of concentrations of plant growth regulator 6-BA on bud germination rate and growth. The results showed that 5 mg/L 6-BA can promote the propagation coefficient ofParispolyphyllaSmith var.chinensis, it also can increase the double buds rate, multiple buds rate and root rate.

ParispolyphyllaSmith var.chinensis；rhizome；asexual propagation

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.05.022

2016-02-26

四川省财政厅基本科研业务费项目—重楼属植物(华重楼)的快速繁育技术研究和四川省科技条件平台项目—四川省植物资源共享平台建设项目共同资助。

谷海燕(1976—)，女，硕士，主要从事植物繁育、植物生态学方面的研究。E-mail:guhy76@163.com

Q945.5

A

1006-9690(2016)05-0086-03