高表达ALDH2基因改善血管内皮细胞功能的初步研究*

胡秀英, 方 琴, 王季石, 马 丹, 蒋 丽

(1.贵州医科大学附院 血液内科， 贵州 贵阳 550004； 2.贵州医科大学附属白云医院 药剂科， 贵州 贵阳 550004)



·基础研究·

高表达ALDH2基因改善血管内皮细胞功能的初步研究*

胡秀英1, 方 琴2**, 王季石1, 马 丹2, 蒋 丽2

(1.贵州医科大学附院 血液内科， 贵州 贵阳 550004； 2.贵州医科大学附属白云医院 药剂科， 贵州 贵阳 550004)

目的： 探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因导入人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后对其增殖和抗氧化损伤的影响。方法:将培养的HUVECs分为转染目的基因组(转基因组)、转染空载体组(空质粒对照组)和未转染质粒组(阴性对照组)，转基因组采用脂质体介导的方法将含人ALDH2基因的真核表达载体导入HUVECs中，采用RT-PCR和Western blot检测各组ALDH2基因和蛋白的表达；采用不同浓度过氧化氢(H2O2)(0、50、75、100和125 μmol/L)孵育HUVECs 48 h后，检测各组细胞增殖水平及氧化损伤程度，检测各组细胞中血红素氧合酶(HO-1)、 ROS及一氧化氮(NO)含量的变化。结果：转基因组荧光强度和数量比阴性对照组显著提高，提示导入的ALDH2基因在HUVECs细胞得到高表达；与空质粒对照组和阴性对照组比较，转染72 h后，转基因组细胞ALDH2 mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)；不同浓度H2O2孵育48 h后，转基因组HUVECs存活率明显升高(P<0.05)；转基因组可抑制一定浓度H2O2诱导的ROS水平的升高、 降低HO-1表达及增加NO的产生，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：ALDH2基因高表达可降低低氧自由基引起的HUVECs细胞的损伤，保护内皮细胞的生物学功能。

乙醛脱氢酶2； 转染； 氧化损伤； 一氧化氮； 内皮细胞

骨髓造血微环境内有大量由血管内皮细胞(endothelial cells, ECs)构成的血窦存在，它与造血干细胞密切接触，影响造血细胞的增殖与自我更新、迁移及定位[1]。然而，ECs在移植后，在机体病理状态下易受到氧化应激、炎症因子以及药物等刺激因素引起的损伤，而氧化应激引起的损伤是内皮损伤发生发展过程中的共同机制之一[2]。……