低抗凝肝素寡糖的制备、结构表征及免疫活性评价

张 晓, 单鑫迪, 赵小亮, 李国云, 王小江, 蔡 超, 郝杰杰, 于广利

(山东省糖科学与糖工程重点实验室, 海洋药物教育部重点实验室,中国海洋大学医药学院, 青岛 266003)



低抗凝肝素寡糖的制备、结构表征及免疫活性评价

张 晓, 单鑫迪, 赵小亮, 李国云, 王小江, 蔡 超, 郝杰杰, 于广利

(山东省糖科学与糖工程重点实验室, 海洋药物教育部重点实验室,中国海洋大学医药学院, 青岛 266003)

以猪肠黏膜来源低抗凝肝素为原料, 采用苄酯碱水解法制备了寡糖. 通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、 高效凝胶渗透色谱(HPGPC)-多角激光光散射法(MALLs)联用、 核磁共振波谱(NMR)和液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术对所制备寡糖的分子量分布及化学结构进行了表征. 以该寡糖对活化X因子(FXa)及人凝血酶(FⅡa)活性的抑制作用评价了其抗凝血活性, 并通过测定其对RAW264.7巨噬细胞吞噬能力及NO释放量的影响评价其免疫活性. 结果表明, 所制备寡糖的聚合度分布于2～22之间, 平均分子质量为5300, 无明显的抗凝血活性, 但具有显著的免疫增强活性.

低抗凝肝素寡糖; 苄酯碱水解; 液相色谱-质谱联用; 免疫增强活性

药用级肝素除了具有抗凝血作用外, 还具有调整血脂浓度、 抗炎及抗过敏等多种功能[1,2]. 由于肝素临床应用时存在导致出血、 血小板减少、 高钾血症及骨质疏松等副作用, 使其在抗炎、 降血脂等方面的临床应用受到限制. 依诺肝素钠是采用苄酯碱水解法制备的一种低分子肝素的钠盐, 与普通肝素钠相比, 依诺肝素钠具有……