柑橘黄龙病病菌FabD蛋白酶的基因克隆与表达*

王俏玲，何 军，李 攀，朱温平，刘 翔，李永东

(赣南师范大学 化学化工学院，江西 赣州 341000)



·有机药物化学·

柑橘黄龙病病菌FabD蛋白酶的基因克隆与表达*

王俏玲，何 军，李 攀，朱温平，刘 翔，李永东†

(赣南师范大学 化学化工学院，江西 赣州 341000)

柑橘黄龙病病菌(CandidatusLiberibacter)是黄龙病的致病菌.脂肪酸是细胞生物膜的重要组成成分，脂肪酸的生物合成对于病原细菌的生存至关重要.干扰病原菌生物膜的合成将抑制病原菌的生长和繁殖.本研究克隆了柑橘黄龙病病菌脂肪酸合成通路中的关键蛋白酶-丙二酸单酰CoA：ACP转酰基酶(FabD，Malonyl CoA: ACP transacylase)基因，构建了该基因在大肠杆菌系统中的表达载体pET28a-FabD，成功实现了该基因在大肠杆菌系统中的重组表达.结果表明，该蛋白酶在大肠杆菌内为包涵体表达，复性后最终制备得到浓度为0.38 mg/mL的可溶性FabD蛋白酶.

柑橘黄龙病病菌；克隆；蛋白表达；FabD

柑橘黄龙病被称为柑橘的“癌症”，严重影响着包括脐橙在内的柑橘生产安全.柑橘黄龙病最早于1919年在我国广东潮汕地区发现，其致病菌为柑橘黄龙病病菌，一种革兰氏阴性菌[1].脂肪酸是生物细胞膜的重要组成成分，是细胞存活所必需的结构性物质，因此，脂肪酸生物合成对于病原菌的生存和繁殖至关重要[2-3].一般地，脂肪酸合成酶系统分为FAS I和FAS II，FAS II则主要存在于细菌和植物中，由一系列小的分离蛋白组成，每一步反应都由完全不同的单功能酶催化完成[4-5].正是由于FAS II与FAS I差异性较大，FAS II通路中的蛋白酶成为了一个极具潜力……