输血相关急性肺损伤对大鼠血浆和肺组织血管生成素-2表达的影响

龚艳杰 魏明 涂玲 刘佳 梁颖红 张宜花 杨璐

基础研究

输血相关急性肺损伤对大鼠血浆和肺组织血管生成素-2表达的影响

龚艳杰 魏明 涂玲 刘佳 梁颖红 张宜花 杨璐

目的 探讨输血相关急性肺损伤（TRALI）时血浆和肺组织中血管生成素-2（Ang-2）的表达及其意义。方法 选择60只SD大鼠，按随机数字表法分为生理盐水（NS）对照组、脂多糖（LPS）对照组、TRALI模型组、急性肺损伤（ALI）对照组，每组15只。采用“LPS-血浆二次打击”法复制TRALI大鼠模型。NS对照组腹腔注射NS 2 mL，移除大鼠血液1 mL后输注等体积NS。LPS对照组大鼠腹腔注射2 mg/kg LPS（1 min内注完） 1 mL 2 h后静脉输注等体积NS。TRALI模型组腹腔注射2 mg/kg LPS 1 mL，2 h后静脉输注血浆1 mL。ALI对照组静脉输注5 mg/kg LPS 1 mL诱导ALI。制模完成后处死大鼠取肺组织观察病理学改变并进行肺损伤评分；取支气管肺泡灌洗液（BALF）检测细胞总数、中性粒细胞比例（NEUT）；用蛋白质免疫印迹试验（Western Bolt）检测血浆中Ang-2蛋白表达；免疫组化法观察肺组织中Ang-2阳性表达；实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测大鼠肺组织中Ang-2 mRNA表达水平。结果 光镜下可见，NS对照组大鼠肺组织结构清楚，肺泡壁结构完整，肺泡内未见炎性细胞渗出及肺泡萎陷，肺泡间隔均一无增宽；LPS对照组肺泡间隔轻度增宽、有少量炎性细胞浸润；TRALI模型组肺泡间隔增宽、中等量出血并有较多炎性细胞浸润；ALI对照组肺内大量炎性细胞浸润，间质水肿加重，伴出血、微血栓及灶性肺不张。ALI对照组、TRALI模型组血浆Ang-2蛋白和肺组织Ang-2 mRNA表达均显著高于NS对照组、LPS对照组〔Ang-2蛋白（灰度值）：0.58±0.09、0.43±0.07比 0.12±0.03、0.20±0.05，Ang-2 mRNA（2-ΔΔCt）：0.39±0.10、0.29±0.09比 0.10±0.05、0.16±0.04，P均＜ 0.01〕；ALI对照组、TRALI模型组BALF细胞总……