植物鲜样中游离氨基酸提取方法的比较

李 梅, 刘金华, 楼兵干, 高其康，

(浙江大学 a.农生环分析测试中心; b.昆虫科学研究所; c.生物技术研究所，浙江 杭州 310058)



植物鲜样中游离氨基酸提取方法的比较

李 梅a, 刘金华b, 楼兵干c, 高其康a，b

(浙江大学 a.农生环分析测试中心; b.昆虫科学研究所; c.生物技术研究所，浙江 杭州 310058)

为了对比不同提取液、温度、时间和纯化试剂对植物鲜样中各游离氨基酸提取效率的影响，以油菜鲜叶为例进行加标回收试验方法，通过氨基酸分析仪PF柱进行标准方法分析测定。结果表明：4种不同提取剂提取油菜鲜叶中游离氨基酸,水、0.1 mol/L盐酸和5%磺基水杨酸的提取效果都优于80%乙醇，以水提取后的颜色最为清亮,适于氨基酸分析仪直接分析；4 ℃时17种氨基酸平均回收率94.23%,高于80 ℃和100 ℃时的88.4%和87.4%，17种氨基酸平均回收率除缬氨酸外,其余氨基酸从1～24 h没有显著变化；80%乙醇优于5%磺基水杨酸，但两者整体回收率都较未纯化前有所下降。采用优化后的提取方法测定油菜幼苗的游离氨基酸含量，发现能有效筛选出抗逆品种。

植物鲜样； 游离氨基酸； 提取； 纯化

0 引 言

植物中氨基酸主要有两种存在形式，一种以游离态形式存在;另一种以结合态存在于肽和蛋白质中[1]。关注植物中游离氨基酸含量变化,主要有以下两个方面:①对食用口感影响重大的呈味氨基酸和有营养保健、药用价值的非蛋白氨基酸,如牛磺酸、γ-氨基丁酸、茶氨酸等只以游离形式存在；②由于一般植物体内游离氨基酸含量很低，在各种胁迫条件下，如干旱[2]、水分[3]、盐分[4]及重金属[5]等逆境时,游离氨基酸含量尤其脯氨酸会有显著增加，故植物游离氨基酸含量变化是植物抗逆重要生理指标[6]。……