不同沉淀方法处理胶乳总RNA对基因扩增效率的影响

吴春太黎瑜冯伟瑜曾日中

（1. 中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 海南省热带作物栽培生理学重点实验室，儋州 571737；2. 海南大学农学院，海口 570228）

不同沉淀方法处理胶乳总RNA对基因扩增效率的影响

吴春太1黎瑜1冯伟瑜2曾日中1

（1. 中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室 海南省热带作物栽培生理学重点实验室，儋州 571737；2. 海南大学农学院，海口 570228）

为探明沉淀方法对胶乳总RNA提取及PCR扩增效率的影响，并寻求较好的RNA沉淀方法，针对胶乳中蛋白、多糖、橡胶粒子含量高的特点，在本实验室改进的SDS法的基础上，分别用LiCl、NaCl+异丙醇、NaCl+NaAc+无水乙醇和NaAc+无水乙醇对橡胶树胶乳总RNA进行沉淀，并对所得RNA的完整性、纯度、含量和RT-PCR扩增效率进行比较。结果表明，4种方法均可获得完好的RNA，但其纯度、含量和PCR扩增效率随方法不同而有所差别，其中NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀的橡胶树胶乳总RNA纯度、产率和18S、REF基因扩增效果均较高，故认为用NaCl+NaAc+无水乙醇沉淀胶乳总RNA是一种较为有效的方法。

橡胶树胶乳；总RNA提取；RNA沉淀

巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）是热带山地主要的经济作物，种植面积大，林产品产量高，其林产品是由胶工通过周期性切割橡胶树树干树皮（即割胶）刺激乳管细胞释放出的天然胶乳，是一种丰富的天然橡胶资源。因其胶乳量极为丰富，并且干胶含量较高，已广泛应用于商业、防御和运输等行业［1］。从分子生物学的角度分析胶乳的形成机制将有助于对天然橡胶生产过程的全面了解。……