利用原生质体融合技术构建耐酸絮凝性产乙醇酿酒酵母

苟敏 杨白雪 汤岳琴 木田建次

（四川大学建筑与环境学院，成都 610065）

利用原生质体融合技术构建耐酸絮凝性产乙醇酿酒酵母

苟敏 杨白雪 汤岳琴 木田建次

（四川大学建筑与环境学院，成都 610065）

为获得具有多种优良性状的高效乙醇生产菌株，以絮凝性酿酒酵母RHZ-1及耐酸耐温酿酒酵母SEB2为亲本，通过紫外诱变获得营养缺陷型标记菌株，并利用原生质体融合技术选育耐酸絮凝性酿酒酵母。通过对融合子的筛选获得一株优秀的耐酸絮凝性酿酒酵母菌株RS-1；该菌株在30℃，pH2.2，15% YPD条件下发酵24 h，乙醇产生量为47.87 g/L，糖消耗速率和基于糖消耗的乙醇收率分别比亲本菌株RHZ-1提高了19.5%和9.8%。在35℃，pH2.2，15% YPD条件下发酵48 h，乙醇产生量为38 g/L，糖消耗速率和乙醇收率分别比亲本菌株RHZ-1提高了46.8%和21.6%。结果表明，获得的菌株可为提高燃料乙醇的生产效率奠定基础。

酿酒酵母；紫外诱变；原生质体融合；耐酸性；乙醇发酵

生物乙醇被认为是传统燃料的重要替代品［1］。酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）凭借较高的糖发酵能力、乙醇耐受性及生物安全性，已成为生产燃料乙醇的首选微生物［2］。大规模工业化生产常通过降低发酵体系的pH值来控制杂菌污染，但酿酒酵母的最适pH值为4.0-5.0，较低的pH会影响酵母的生长及发酵能力［2］。此外，木质纤维素已成为燃料乙醇生产的重要原料。利用其制备燃料乙醇通常包括木质纤维素的预处理、纤维素水解，以及糖类发酵产乙醇3个关键步骤［1］。而木质纤维素经稀酸预处理后的水解液pH较低，导致后续过程中酵母的生长及发酵受到抑制［2，3］。……