花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究

杨慧珍任志强肖建红卜华虎刘惠民

（1. 山西省农业科学院作物科学研究所，太原 030031；2. 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室，太原 030031）

花粉介导法获得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究

杨慧珍1，2任志强2肖建红2卜华虎2刘惠民2

（1. 山西省农业科学院作物科学研究所，太原 030031；2. 农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室，太原 030031）

为获得耐草甘膦转基因玉米植株，进而研究其除草剂耐性及外源基因的遗传特性，以质粒pBI101-aroA-M12为外源基因供体，以玉米自交系昌‘7-2’为受体，采用花粉介导法将外源基因导入玉米自交系中。PCR扩增、Southern杂交分析的结果证明获得了54个转基因植株；对其后代株系的分子检测及田间生物学鉴定，结果证明目的基因可以稳定遗传给后代植株，且赋予和提高了转基因植株的除草剂耐性。目的基因在转化体中的遗传规律研究，结果显示导入的目的基因在F2受体植株中以3∶1的比例发生遗传分离，符合孟德尔单因子显性遗传分离规律。ELISA分析和蛋白质浓度测定的结果证实目的基因在转化植株中得到表达，表达量介于40.5-112.6 ng/g 叶片鲜重之间，目的基因表达量与该植株的除草剂耐性性状间呈极显著相关，r=0.942 3（P＜0.01）。最终研究获得了4个高草甘膦耐性的转基因纯合株系。

玉米；aroA-M12基因；草甘膦耐性；花粉介导；遗传分析

中国是世界上位居第二的玉米（Zea mays L.）生产大国，年玉米种植面积3 000多万hm2，玉米产量达亿余吨，占世界上玉米总产量的20%。即便如此，从2009年开始，我国还是成为玉米的净进口国。……