红麻MYB21基因的克隆、表达及载体构建

钱景华 周步进 孔祥军 李增强 史奇奇 廖小芳 周瑞阳 陈鹏

（广西大学农学院 广西高校植物遗传育种重点实验室，南宁 530004）

红麻MYB21基因的克隆、表达及载体构建

钱景华 周步进 孔祥军 李增强 史奇奇 廖小芳 周瑞阳 陈鹏

（广西大学农学院 广西高校植物遗传育种重点实验室，南宁 530004）

克隆红麻不育系和保持系的MYB21基因，分析MYB21基因在红麻不育系和保持系各器官的表达量，并构建过表达载体和RNAi载体，旨在为进一步研究该基因在红麻中的功能奠定基础。以同源克隆的方法克隆MYB21基因；用实时荧光定量的方法分析MYB21基因在红麻不育系和保持系不同组织器官的表达模式；根据酶切-连接的方法，构建过表达载体和RNAi载体。结果显示，红麻MYB21基因在不育系和保持中的基因序列没有差异，其cDNA全长序列为922 bp，包含843 bp的开放阅读框，DNA全长序列为1 108 bp，包含3个外显子和2个内含子（NCBI序列登录号为KT898146）；MYB21基因主要在花药中表达，在不育系和保持系花药之间表达量呈极显著差异；成功构建MYB21过表达载体和RNAi载体。成功克隆MYB21基因的全长序列；实时荧光定量结果表明MYB21基因主要在花药中进行表达；构建的植物过表达载体PBI121-MYB21和RNAi载体pART27-PK-R1-F2可用于该基因的功能研究。

红麻；细胞质雄性不育；MYB21基因；实时荧光定量；载体构建

红麻（Hibiscus cannabinus L.）属于锦葵科木槿属一年生韧皮纤维作物，传统用途是作为纺织、生产麻绳、麻袋、地毯等的原料。同时，红麻也是一种多用途作物，被广泛应用于造纸、建材、土壤修复、饲料等各种领域［1-2］。

作物细胞质雄性不育（CMS）是作物杂种优势利用的主要途径，利用CMS配制杂交种，克服了人工授粉的种种弊端，大大减少劳动量，同时能够提高杂交种子的纯度，增加作物的产量［3］。……