马尾松毛虫质型多角体病毒NSP1蛋白在昆虫细胞表达及定位

靳亮许翠萍王金昌关丽梅张稳超黄朝高学梅王洪秀

（1. 江西省科学院微生物研究所，南昌 330029；2. 江西省科学院鄱阳湖重点实验室，南昌330029；3. 鲁东大学生命科学学院，烟台 264025；4. 江西省农业科学院农业应用微生物研究所，南昌 330200）

马尾松毛虫质型多角体病毒NSP1蛋白在昆虫细胞表达及定位

靳亮1，2许翠萍3王金昌1关丽梅1张稳超1黄朝1高学梅1王洪秀4

（1. 江西省科学院微生物研究所，南昌 330029；2. 江西省科学院鄱阳湖重点实验室，南昌330029；3. 鲁东大学生命科学学院，烟台 264025；4. 江西省农业科学院农业应用微生物研究所，南昌 330200）

马尾松毛虫质型多角体病毒（Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus，DpCPV）基因组S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 kD的非结构蛋白（NSP1）。为探寻DpCPV NSP1蛋白的功能，将DpCPV 1基因组S5-1片段的抗原区（1-600 bp）进行了原核表达，并将纯化蛋白免疫家兔，制备多克隆抗体。将稀释后的病毒液感染甜菜夜蛾幼虫，感染后每天解剖甜菜夜蛾并取中肠样品，通过Western blot检测NSP1蛋白的合成时间曲线。Western blot检测结果显示，S5片段表达的蛋白在病毒感染第1天就有合成，并且除了检测到全长的蛋白（101 kD）外，也检测到了80 kD和20 kD的蛋白条带，说明NSP1蛋白为早期表达蛋白，并且蛋白发生了切割。另外，首次对DpCPV 1 S5片段进行了在昆虫细胞中表达和昆虫亚细胞定位，结果显示，昆虫细胞定位于细胞的细胞质。

马尾松毛虫质型多角体病毒；NSP1；抗体制备；真核表达；细胞定位

质型多角体病毒（Cytoplasmic polyhedrosis virus）属于呼肠孤病毒科质型多角体病毒属。根据第九次国际病毒分类会议制定质型多角体病毒的分……