松墨天牛谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶基因克隆与表达

蔡紫玲，吴华俊，林 同

(华南农业大学林学与风景园林学院，广东 广州 510642)

松墨天牛谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶基因克隆与表达

蔡紫玲，吴华俊，林 同*

(华南农业大学林学与风景园林学院，广东 广州 510642)

谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶(glutamine-fructose-6-phosphate aminotransferase，GFAT)是己糖胺通路(HBP)的限速酶, 参与几丁质的合成和蛋白质的糖基化。本研究利用RACE克隆了松墨天牛GFAT基因(MaGFAT)，GenBank登录号为 KT362367，其长度为2624 bp，开放阅读框为2061 bp，编码686个氨基酸。序列对比分析显示MaGFAT与赤拟谷盗相似性最高，为88 %，在系统发育树上位于同一分支。采用RT-qPCR方法检测MaGFAT在松墨天牛不同组织及不同发育时期的表达情况，结果表明：MaGFAT在各虫态中，成虫中的表达量最高；在成虫部位中，翅的表达量最高；在幼虫各组织中，体壁的表达量最高。本文为研究GFAT结构与功能的关糸奠定基础，为阐明GFAT在松墨天牛几丁质合成中的作用提供参考。

松墨天牛；谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶；基因克隆；RT-qPCR

谷氨酰胺6-磷酸果糖酰胺转移酶(glutamine-fructose-6-phosphate aminotransferase，GFAT)是己糖胺通路(HBP)的限速酶[1]，参与几丁质的合成和蛋白质的糖基化。葡萄糖进入细胞后先转变为6-磷酸果糖，在GFAT催化下生成6-磷酸葡糖胺，经过中间代谢环节，最终转化为二磷酸尿嘧啶N-乙酰氨基葡萄糖(UDP-GlcNAc)[2]。其中，UDP-GlcNAc是蛋白质糖基化的重要底物，也是几丁质(β-1，4-N-乙酰-D-葡萄胺(β-(1-4)-NAcGA))的活性前体。几丁质是细菌和真菌的细胞壁重要组成成分[3]，也是节肢动物的表皮和中肠围食膜(PM)的主要成分[4]。Hornung 等指出GFAT在几丁质从头合成中起重要作用[5-7]。

松墨天牛(MonochamusalternatusHope)，隶属于鞘……