Mindbomb同源物2基因转染对人脑胶质瘤细胞U251增殖的影响及其机制

单小松，刘海鹏，郑克彬，方川，丁亚楠

(河北大学附属医院，河北保定071000)

Mindbomb同源物2基因转染对人脑胶质瘤细胞U251增殖的影响及其机制

单小松，刘海鹏，郑克彬，方川，丁亚楠

(河北大学附属医院，河北保定071000)

目的 观察Mindbomb同源物2(MIB2)基因转染对人脑胶质瘤细胞U251增殖的影响，并探讨其作用机制。方法 将U251细胞分为空白对照组、阴性对照组、实验组1、实验组2；空白对照组不作任何处理，阴性对照组转染空载体FLAG质粒，实验组1转染MIB2-FLAG质粒，实验组2转染siMIB2。用PCR法检测各组细胞的MIB2 mRNA，用蛋白质印迹法检测各组细胞的MIB2、核因子κB(NF-κB)抑制性蛋白(IκB)、NF-κB蛋白，用MTT法检测各组细胞的光密度值。结果 实验组1的MIB2 mRNA相对表达量为19.43±3.21、实验组2为0.43±0.17、阴性对照组为1.03±0.12；实验组1、实验组2与阴性对照组相比，P均<0.01。实验组1的MIB2、核因子κB(NF-κB)抑制性蛋白、NF-κB蛋白相对表达量分别为5.11±0.41、0.49±0.13、4.99±0.32，实验组2分别为0.43±0.17、3.12±0.36、0.49±0.14，阴性对照组分别为1.09±0.11、1.02±0.46、1.01±0.21；实验组1、实验组2与阴性对照组相比，P均<0.01；在36、48、72 h三个时点，与阴性对照组和空白对照组相比，实验组1的U251细胞光密度值升高(P均<0.01)。结论 转染MIB2基因后人脑胶质瘤U251细胞的增殖能力增强，MIB2基因可能是通过MIB2蛋白调控NF-κB信号通路而发挥作用。

Mindbomb同源物2；核因子κB；核因子κB抑制性蛋白；脑胶质瘤；细胞增殖

人脑胶质瘤是颅内常见的侵袭性肿瘤之一。核因子κB(NF-κB)信号通路的异常活化在脑胶质瘤的发生和发展过程中发挥了重要作用[1,2]。作为一种重要的核转录调控因子，NF-κB在不同类型的肿瘤发生过程中均有异常活化，它可以抑制有缺陷的细胞进入凋亡的过程、促进肿瘤细胞增殖、辅助肿瘤细胞转移、诱导肿瘤细胞对放疗和化疗的耐受并导致肿瘤复发[3]。NF-κB表达被其抑制分子NF-κB抑制性蛋白(IκB)所调控，IκB可以与NF-κB的Rel同源结构域相互作用，通过覆盖NF-κB上的核定位序列阻碍其活化[4]。Mindbomb同源物2(MIB2)是泛素连接酶E3的配体，它可以通过泛素化途径降解IκB并最终实现对NF-κB的调控[5]。脑胶质瘤细胞内是否存在泛素化调节途径一直未见报道。……