MK886对人结肠癌细胞HT-29增殖及Ascl2表达的影响

李仕宇，朱蓉，刘梅，周本刚，赵逵

(1 遵义医学院附属医院，贵州遵义563000；2 遵义市第一人民医院)

MK886对人结肠癌细胞HT-29增殖及Ascl2表达的影响

李仕宇1，2，朱蓉1，刘梅1，周本刚1，赵逵1

(1 遵义医学院附属医院，贵州遵义563000；2 遵义市第一人民医院)

目的 探讨5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)抑制剂MK886对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响及其作用机制。方法 分别采用12.5、25、50、75、100、200 μmol/L的MK886干预体外培养的HT-29细胞，分别于干预24、48 h时采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率，结果显示MK886抑制HT-29细胞增殖最佳作用时间为48 h、最佳浓度为48.12 μmol/L。选择48.12 μmol/L MK886干预HT-29细胞(MK886组)，另设对照组(不干预)，干预24 h时采用Real-time PCR技术检测Ascl2 mRNA表达，干预24、48、72 h时分别采用Western blotting法检测 Ascl2 mRNA和蛋白表达。结果 经过48.12 μmol/L MK886干预24 h时HT-29细胞中Ascl2 mRNA相对表达量为0.35±0.02，对照组为0.72±0.02，两组比较P<0.01。48.12 μmol/L MK886作用24、48、72 h时HT-29细胞中Ascl2蛋白相对表达量分别为1.75±0.13、1.10±0.15、0.71±0.19，均较对照组降低(P均<0.05)；且随着MK886作用时间延长，Ascl2蛋白相对表达量逐渐下调(P均<0.05)。结论 FLAP抑制剂MK886能抑制人结肠癌细胞HT-29增殖，其机制可能与下调Ascl2 mRNA和蛋白表达有关。

结肠癌；MK886；5-脂氧合酶活化蛋白；Ascl2

结直肠癌是发病率和病死率均较高的恶性肿瘤之一，近年来其发病呈年轻化趋势[1,2]。花生四烯酸(AA)是人体必需脂肪酸，在体内代谢后可生成多种有生物活性的物质，如类二十烷酸等。这些代谢产物在肿瘤进展、转移、血管生成等方面具有重要作用[3]。AA主要通过脂氧合酶(LOX)和环氧合酶(COX)途径代谢[4]，而非甾体类抗炎药(NSAIDs)或其他抑制剂均能抑制这两条代谢途径，继而抑制肿瘤细胞增殖并延缓肿瘤进展[5]。5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)抑制剂在临床已广泛用于治疗哮喘、关节炎等慢性炎症性疾病[6]，但其对肿瘤细胞的作用鲜见报道。2015年5～8月，本研究观察了FLAP抑制剂MK886对结肠癌细胞增殖的影响，现分析结果，并探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料 人结肠癌细胞株HT-29，购自中国科学院上海细胞库。……