幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中血液学和肠道黏膜免疫指标的观察

许江城 ， 刘 斌 ， 蔡京美 ， 金孟燮 ， 佘锐萍

(1.中国农业大学动物医学院 ， 北京 海淀 100193 ; 2.北京韩美药品有限公司 ， 北京 顺义 101312)

免疫抑制动物模型在新药开发与评价中广泛使用，现有研究多使用成年动物建模[1-2]。由于幼龄个体与成年个体在药物代谢和药效方面不完全一致，使用幼龄动物模型进行研究和评价幼龄个体用药已经成为共识并得到各国药物监管机构的推荐。

目前幼龄大鼠免疫抑制模型的相关报道较少。参考成年动物研究[3-5]，观察本课题组建立的幼龄大鼠环磷酰胺(CYP)免疫抑制模型，探索血液学和肠道黏膜免疫指标变化特点，为模型今后的应用提供更多数据支持。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁级雌性4周龄SD大鼠60只，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。饲养在北京韩美药品有限公司动物房屏障环境内(许可证号：SYXK(京)2015-0013)，试验经IACUC委员会批准，独立通风笼架(IVC)饲养，自由采食和饮水。

1.2 仪器和试剂 仪器：SYSMEX XT-2000i血液分析仪，日立7020生化分析仪。试剂：希斯美康血液分析试剂，美康生化分析试剂，PAS染色试剂盒(Sigma公司,395B-1KT)，环磷酰胺单水合物(东京化成工业株式会社)，sIgA一抗(北京博奥森生物技术有限公司，bs-0645R)。

1.3 试验分组 环磷酰胺免疫抑制模型组随机选取30只雌性4周龄SD大鼠口服给与环磷酰胺30 mg/kg体重隔1日共2次，剩余30只编入对照组。

1.4 体重和临床观察 自第一次给药起，共观察14 d。临床观察包含死亡数，一般健康状况和毒性症状。每日称量大鼠体重并记录(n=10)。

1.5 血液学指标检测 第2、4、8、15天，测定红细胞数(RBC)、白细胞总数(WBC)、嗜中性粒细胞数(NEUT)、淋巴细胞数(LYMPH)、嗜酸性粒细胞数(EO)、嗜碱性粒细胞数(BASO)、单核细胞数(MONO)和网织红细胞数(RET)。……