体外诱导的粘蛋白抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞抗乳腺癌的研究

李 帆 姬 静 史鹏燕 董文娟 刘 勇

体外诱导的粘蛋白抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞抗乳腺癌的研究

李 帆 姬 静 史鹏燕 董文娟 刘 勇

目的 制备携带粘蛋白(MUC1)抗原基因的重组腺相关病毒(AAV/MUC1)，研究其感染树突状细胞(DC)所诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤肿瘤细胞的活性。方法 应用分子生物学方法制备高低度的重组腺相关病毒(AAV/MUC1)。AAV/MUC1体外感染外周血单核细胞，诱导分化为DC。DC与T淋巴细胞混合，刺激产生CTL。流式细胞技术检测DC和CTL的分化和功能指标，MTS方法检测CTL的杀伤活性和特异性。结果 成功制备的重组病毒(AAV/MUC1)滴度为6×1010拷贝/ml。感染单核细胞率为84.27%。所获得的CTL对MUC1阳性的乳腺癌细胞株的杀伤率为(46.32±0.07)%。其杀伤作用具有MUC1抗原特异性和MHC-I类分子限制性的特征。结论 以MUC1抗原为靶点的CTL可有效地杀伤乳腺癌细胞，为乳腺癌提供了一条新的治疗途径。

树突状细胞；细胞毒性T淋巴细胞；粘蛋白；腺相关病毒；乳腺癌

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:012～015)

粘蛋白(MUC1)又称糖类抗原CA15-3，是1种肿瘤相关抗原，具有较强的免疫原性。MUC-1在90%的乳腺癌中高表达，且MUC-1的表达量与乳腺癌患者的瘤负荷量成正相关[1-2]。肿瘤细胞表达的MUC1与正常细胞有所不同，是免疫细胞攻击的重要靶点[3]。本研究的目的是以MUC1作为乳腺癌治疗的靶点，为建立一种有效的靶向性细胞免疫治疗的方法提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 载体、细胞和主要试剂

腺相关病毒(AAV)载体构建系统(美国阿肯色大学赠送)，细胞株(ATCC公司)，细胞培养基和细胞因子(Life公司)，限制性内切酶和MTS试剂(Promega公司)，单克隆抗体(BD公司)。……