护胃散对急进高原大鼠胃黏膜血管内皮生长因子、碱性成纤维生长因子水平的影响及其机制探讨*

邹小云，李军茹，贾守宁，杨翠兰，曹生海，马春花

1.青海大学研究生院(西宁 810000)，2.青海省中医院(西宁 810000)

·实验研究·

护胃散对急进高原大鼠胃黏膜血管内皮生长因子、碱性成纤维生长因子水平的影响及其机制探讨*

邹小云1，2，李军茹2△，贾守宁2，杨翠兰2，曹生海2，马春花2

1.青海大学研究生院(西宁 810000)，2.青海省中医院(西宁 810000)

目的：探讨护胃散对急进高原大鼠胃黏膜血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)的水平影响及作用机制。方法：选用Wistar大鼠，随机分为北京组、急进高原组(西宁组、玛多组)，其中，玛多组设空白对照组、阳性药组、护胃散组。北京组、西宁组、玛多空白对照组给予生理盐水，阳性药组给予荆花胃康胶丸及护胃散组(高、中、低剂量)，各组分别于第1天、2天、3天、5天、7天取大鼠胃黏膜，并用ELISA法测定VEGF、bFGF水平。结果：研究表明，随着海拔的升高、时间的延长，大鼠胃黏膜中VEGF、bFGF的水平不断增加；与北京组比较，护胃散能有效提高急进高原大鼠胃黏膜VEGF、bFGF的水平(P<0.05或P<0.01)。结论：护胃散能有效提高急进高原大鼠胃黏膜VEGF、bFGF的含量，在急性胃黏膜损伤修复方面发挥着重要作用。

高原环境具有低氧、低大气压、干燥、寒冷、强紫外线辐射等特点[1]，其独特的气候与多种急慢性高原病的发病有关。中医学认为高原地区清气不足、宗气匮乏，难以助肺以司呼吸、调血运，加上高原环境干燥、寒冷的气候特点，从而易导致机体营血出现“浓、稠、粘、聚”等病理生理特征[2]。研究表明，应激状态下可致机体出现急性胃黏膜病变[3]，而VEGF、bFGF在此损伤、修复过程中起着重要作用。本研究根据多年临床用药经验并结合中医辨证论治理论，组成中藏药组方护胃散，探讨其对急进高原大鼠胃黏膜VEGF、bFGF水平变化的影响及作用机制。

材料与方法

1 实验动物 Wistar大鼠，雌雄各半，体重(200±10g)，由北京金牧阳实验动物养殖有限责任公司供给，于实验当日购进动物。

2 实验用药 护胃散方药：大花红景天等(方中药物组成、相关制备工艺正申请有关专利，尚不宜公开)。规格：制成1g/mL，由青海省中医院制剂室制备。阳性对照药：荆花胃康胶丸(国药准字号：Z10970067)。

3 实验试剂 VEGF及bFGF检测试剂盒，由上海源叶生物科技有限公司、南京建成生物工程研究所提供。

4 分组及给药 将350只大鼠随机分组，雌雄各半，分为北京组、急进高原组(西宁组(海拔2260 m)、玛多组(海拔4270 m))。其中，北京组、西宁组各50只；玛多组250只，并设空白对照组、阳性药组(2.4 g/kg)、护胃散(2.6 g/kg、5.2 g/kg、10.4 g/kg)组，每组50只；北京组、西宁组及玛多空白对照组予生理盐水；以上各组均以灌胃的方式给药，体积均为2 ml。将北京组大鼠运至中国中医科学院动物实验室，急进高原组中西宁组送至青海省中医药研究院动物实验室，同时将玛多组大鼠乘汽车转运至青海省果洛州玛多县。各组均于实验当天开始给药，1次/d，共7 d。

5 取 材 分别于灌药后第1 d、2 d、3 d、5 d、7 d取材，北京组、西宁组、玛多各用药组和空白对照组每天均杀10只，雌雄各半，剪取胃黏膜组织(组织标本送于兰州大学医学院进行本研究的指标检测)。

6 观察和测定指标 ①大体表征观察 ：观察7 d内北京组、西宁组及玛多组大鼠的活动情况，毛色、舌质变化以及摄食摄水量、粪质的变化等。② VEGF、bFGF含量的测定：北京组、西宁组、玛多组分别于第1 d、2 d、3 d、5 d、7 d取大鼠胃黏膜组织，用ELISA法测定VEGF、bFGF的含量。

结 果

1 大体表征观察 北京组：大鼠整体情况活跃，被毛色泽光亮，饮食及摄水量正常，粪便成形、质软，舌质淡红；西宁组大鼠以上表征变化不甚明显；与北京组比较，玛多组大鼠的活动量减少，被毛蓬松、色泽枯燥黯淡，摄食及摄水量均减少，粪便稀溏或不成形，舌质暗红或紫暗，但用药组，尤其是护胃散中、高剂量组以上几种情况均得到了明显改善。

2 护胃散对大鼠胃黏膜VEGF、bFGF含量的影响 见表1、表2。由表1、表2知，急进高原组胃黏膜VEGF、bFGF的含量总体高于北京组(P<0.05或P<0.01)；急进高原组中，玛多组总体高于西宁组(P<0.05)；随着海拔的升高，时间的延长，VEGF、bFGF总体含量越高，尤其是在急进损伤第3天开始，二者升高比例较大；同时，玛多各用药组总体高于空白对照组(P<0.05或P<0.01)。

表1 护胃散对各组大鼠胃黏膜VEGF含量的影响 (pg/ml)

注：西宁组、玛多空白对照组与北京组比较，△P<0.05，▲P<0.01；西宁组与玛多空白对照组比较，◇P<0.05；玛多各给药组与空白对照组比较，□P<0.05

表2 护胃散对各组大鼠胃黏膜bFGF含量的影响(pg/ml)

注：西宁组、玛多空白对照组与北京组比较，△P<0.05，▲P<0.01；西宁组与玛多空白对照组比较，◇P<0.05；玛多各给药组与空白对照组比较，□P<0.05，■P<0.01

讨 论

当机体受到缺氧、寒冷等应激原刺激后，可致胃黏膜局部交感神经、迷走神经兴奋性升高，造成神经递质及炎症细胞因子等的释放，血管收缩引起胃黏膜缺血、缺氧。研究发现，低氧、酸中毒均能致急性胃黏膜损伤，最终导致黏膜屏障及黏膜微循环损伤而引起应激性胃黏膜损伤[4]，VEGF、bFGF在此损伤及修复过程中发挥着重要作用。

VEGF可促进内皮细胞增殖，bFGF可促进细胞活化分裂[5]。急进高原引起的应激性胃黏膜损伤属于中医“胃痞”、“胃脘痛”范畴，本研究团队从事中医药防治急慢性高原病多年，认识到高原急性胃黏膜病变的发生与高原低氧明确相关，其病机为大气不足，宗气虚弱，饮食不节，脾胃虚弱，气虚血瘀，络脉失养等，故自拟护胃健脾，益气活血，化瘀通络[6]之中藏药复方护胃散。红景天性平，味甘、苦涩，归肺、心经，功效益气活血、清肺、散瘀消肿。现代药理学研究表明，其具有抗缺氧、抗疲劳等作用。本研究通过大鼠急进高原并在护胃散的作用下，测定各组大鼠胃黏膜中VEGF、bFGF的含量。本研究示，随海拔的升高、时间的延长，急进高原组(西宁组、玛多组)大鼠胃黏膜VEGF、bFGF含量亦升高；由表1、表2示，护胃散能有效提高急进高原大鼠胃黏膜VEGF、bFGF含量，但玛多组与西宁及北京组比较：随海拔的升高及用药剂量的变化，部分VEGF、bFGF含量于实验第1～3 d并未上升，反而降低，却于第3天开始呈较明显的升高，此现象可能与两者表达受环境因素影响、大鼠个体适应性及药物作用时间等有关。

综上可知，护胃散在胃黏膜损伤修复方面发挥着重要作用，是一种值得推广使用的有效药物。同时，随着社会对高原医学事业的不断深入和拓展，通过此研究，针对将来传统中医药在胃黏膜保护、修复方面的调控作用及临床实践应用方面进行不同层次的探索、研究，有望开辟出广阔的前景。

[1] 张娟玲,李向阳.高原低氧影响药物代谢的研究进展[J].药学学报,2015,50(9):1073-1079.

[2] 李军茹,陈卫国,贾守宁,等.藏药复方对高原气虚血瘀证动物微循环影响的研究[J].时珍国医国药,2015,26(1):56-58.

[3] 刘 寿,格日力.应激性胃黏膜病变相关因子的研究进展[J].国际消化病杂志, 2010,30(1):14-17.

[4] 熊元治.重视慢性高原病胃黏膜病变的临床研究[J].中国消化内镜,2008,2 (12):20-22.

[5] 薛晓辉.VEGF和bFGF在增生性玻璃体视网膜病变患者玻璃体中的表达及意义[J].陕西医学杂志,2016,45(6):707-709.

[6] 寇 媛,杨 波.补脾通络方治疗慢性萎缩性胃炎脾虚血瘀证的临床研究[J].陕西中医,2015,36(1):19-21.

(收稿：2016-10-09)

The experimental study of Huweipowder onvascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) level changes in gastric mucosa of rats in acute plateau

Zou Xiaoyun，Li Junru，Jia Shouning， et al.

Graduate College of Qinghai University(Xining 810000)

Objective:To study the effect of Huwei powder on the levels of VEGF and bFGF ingastric mucosa of radical plateau rats and its mechanism.Methods:Choose Wistar rats,randomly divided intoBeijing group,radical plateau groups(Xining group,Maduo group),of which,Maduo group sets up blank control group,positive control group,Huwei powdergroups.Beijing group,Xining group,blank control group of Maduo give the physiological saline,positive control group gives Jinghua Weikang capsules and Huwei powder groups(high,medium and lowdoses),and each group respectively obtains rats’ gastric mucosain1 d,2 d,3 d,5 d,7 d,and the levels of VEGF and bFGF were detected by ELISA method.Results:The study shows that with the increase of altitude and the extension of time,the rats’ gastric mucosa levels of VEGF and bFGF increased.Compared with Beijing group,Huwei powder could effectively increase the levels of VEGF and bFGF ingastric mucosa of acute rats(P<0.05 orP<0.01).Conclusion: Huwei powder can effectively improve the levels of VEGF and bFGF ingastric mucosa of radical plateaurats,and plays an important role in repair of acute gastric mucosal injury.

@Radical plateau @Huwei powder Rats Gastric mucosa VEGF bFGF

*青海省科学技术厅应用基础研究项目(2014-ZJ-918)

@急进高原 @ 护胃散 大鼠 胃黏膜 VEGF bFGF

R573

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.02.057

△通讯作者