多发性骨髓瘤患者免疫表型及循环血miRNA表达情况研究

李 兴，马丽娜，彭大为△，王美清

(中南大学湘雅医学院附属海口医院/海口市人民医院:1.肿瘤化疗科;2.神经内科，海口570208)

·经验交流· doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2017.04.037

多发性骨髓瘤患者免疫表型及循环血miRNA表达情况研究

李 兴1，马丽娜2，彭大为1△，王美清1

(中南大学湘雅医学院附属海口医院/海口市人民医院:1.肿瘤化疗科;2.神经内科，海口570208)

[摘要] 目的 研究及分析多发性骨髓瘤患者免疫表型及循环血微RNA(miRNA，miR)的表达情况。方法 选取2010年1月至2015年6月于该院进行诊治的65例多发性骨髓瘤患者为观察组，同时期的65例正常骨髓患者为对照组，将两组的免疫表型及循环血 miRNA表达情况进行检测及比较，并比较观察组中不同分期及治疗情况者的检测结果。结果 观察组的CD38、CD56、CD138及CD20阳性率均高于对照组，循环血 miR-21及miR-32高于对照组，而循环血miR-16及miR-335则低于对照组，且观察组中分期较高及复治难治者的CD38、CD56、CD138及CD20阳性率、循环血 miR-21及miR-32均高于分期较低及初治者，循环血miR-16及miR-335则低于分期较低及初治者(均P<0.05)。结论 多发性骨髓瘤患者的免疫表型及循环血 miRNA呈现异常表达的状态，且其表达水平受疾病分期及治疗情况的影响也较大。

多发性骨髓瘤；免疫表型分型；微RNAs

多发性骨髓瘤在恶性血液疾病中并不少见，临床对于本病的相关研究较多，其中关于血液指标相关的研究尤为多见[1-2]，而循环血微RNA(miRNA，miR)是近年来在本病研究中较为多见的指标，但是对其细致全面的探讨仍相对不足，另外，较多研究显示，免疫表型异常在此类患者中也较为明显，但是关于此方面的全面研究也十分匮乏[3]。因此，本文就多发性骨髓瘤患者免疫表型及循环血miRNA的表达情况进行研究分析，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年1月至2015年6月于本院进行诊治的65例多发性骨髓瘤患者为观察组，同时期的65例正常骨髓患者为对照组。两组研究对象的年龄与性别等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。

复治患者指接受1次及1次以上治疗后出现病情进展者；难治指对初始治疗无反应或反应较差的患者。

1.2 方法 采集两组研究对象的骨髓液及循环血标本送检，骨髓标本及血液标本送检，将两组的免疫表型及循环血 miRNA表达情况进行检测及统计。其中骨髓标本检测指标为免疫表型相关指标，包括CD38、CD56、CD138、CD20，以三色流式分析方案进行检测，另外血液标本检测指标则为miR-16、miR-21、miR-335及miR-32，其以实时定量PCR扩增法进行处理。然后将两组研究对象的上述检测指标进行分别统计及比较，并比较观察组中不同分期及治疗情况者的检测结果。

2 结 果

2.1 两组研究对象的免疫表型比较 观察组的CD38、CD56、CD138及CD20阳性率均高于对照组，且观察组中不同分期及治疗情况者的表达也存在明显差异，即分期较高及复治难治者的阳性率均高于分期较低及初治者，差异有统计学意义(均P<0.05)，见表2。

2.2 两组研究对象的循环血miRNA指标表达情况比较 观察组的循环血 miR-21及miR-32高于对照组，而循环血miR-16及miR-335则低于对照组，且观察组中不同分期及治疗情况者的表达也存在明显差异，即分期较高及复治难治者的循环血 miR-21及miR-32均高于分期较低及初治者，分期较高及复治难治者的循环血miR-16及miR-335均低于分期较低及初治者，差异有统计学意义(均P<0.05)，见表3。

a:P<0.05,与对照组比较；b:P<0.05，与Ⅱ期患者比较；c:P<0.05,与Ⅰ期患者比较；d:P<0.05,与初治患者比较；-：此项无数据。

表3 两组研究对象的循环血 miRNA指标表达情况比较±s)

a:P<0.05,与对照组比较；b:P<0.05,与Ⅰ～Ⅱ期患者比较；c:P<0.05,与Ⅰ期患者比较；d:P<0.05，与初治患者比较。

3 讨 论

多发性骨髓瘤作为临床的恶性浆液性细胞病，临床对其重视程度较高，相关研究也较多。此类恶性肿瘤患者的临床表现较为多样，其中骨痛、贫血及多器官异常等均十分常见[4-5]，因此其临床表现对于疾病的诊断特异性相对较低，而临床用于本病诊断的指标主要以组织学活检为主，浆细胞瘤的检出是本病诊断的主要标准，但是临床中近年来出现较多与疾病相关的血液及其他指标异常的研究[6-7]，而这些指标对于疾病的有效诊断具有积极的临床意义，故在本病的诊断过程中，对于这些指标的全面细致掌握极为重要。本病作为浆液性细胞疾病，对于本病患者进行浆细胞免疫表型的变化研究价值则较高[8-9]，以往临床中也可见关于多发性骨髓瘤患者浆细胞免疫表型变化的相关研究，但是众多研究之间不仅仅存在着一定的差异，且存在差异极大的情况，鉴于此种情况的存在，对于多发性骨髓瘤患者进行进一步的免疫表型特点的研究分析则极为必要，CD38、CD56、CD138及CD20作为浆细胞检测中特异程度较高的几类指标，对其在多发性骨髓瘤患者中的表达情况探讨价值较高，空间也较大[10]。另外，循环血 miRNA指标是近年来在临床中多类疾病中均呈现出较大异常状态的指标，其对于基因转录后的水平表达具有较大的影响作用，且其调控作用也较为明显，因此其在疾病诊断中的价值较高[11-12]。而多发性骨髓瘤作为恶性肿瘤中的一类，其此方面的变化探讨更是有必要，较多与恶性肿瘤相关的基因指标在此类患者中可呈现异常的状态，其中miR-16、miR-21、miR-335及miR-32作为在恶性肿瘤患者中表达异常程度较高的几类指标，其与骨髓瘤细胞的增殖机制及过程均有密切的关系，对于异常浆细胞也有积极的反映价值[13-15]，临床认为此方面在多发性骨髓瘤患者中的变化研究价值较高，另外临床认为此类指标对于预后的反映价值也较高，鉴于这些因素笔者认为对上述指标进行全面探讨的价值意义重大。

本文中笔者就多发性骨髓瘤患者免疫表型及循环血 miRNA表达情况进行观察研究，并与正常骨髓的患者进行比较，比较结果显示，多发性骨髓患者的CD38、CD56、CD138及CD20阳性率均高于正常骨髓者，循环血 miR-21及miR-32高于正常骨髓者，而循环血miR-16及miR-335则低于正常骨髓者，且多发性骨髓瘤患者中不同分期及治疗情况者的表达也存在明显差异，说明其不仅仅对于疾病的诊断有积极的临床价值，且对于疾病分期和治疗情况者也有积极的检测价值。分析原因，疾病发生发展过程中，浆细胞的异常表达表现出免疫表型的异常，而这种异常的检出为疾病的诊断提供了依据，另外，循环血miRNA指标的异常表达提示此类患者致癌基因的异常，因此可对本类疾病的诊断提供依据。综上所述，笔者认为多发性骨髓瘤患者的免疫表型及循环血 miRNA呈现异常表达的状态，且其表达水平受疾病分期及治疗情况的影响也较大。

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李兴(1982-)，主治医师，硕士，主要从事肿瘤研究。△

，E-mail:PengDawei@163.com。

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