狼毒大戟中二萜成分的研究

马玉坤 白丽明 郭丽娜 王 健

(1.齐齐哈尔大学 化学与化工学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006；2.齐齐哈尔医学院 药学院，黑龙江 齐齐哈尔 161000)

狼毒大戟(EuphorbiaFischerianaSteud. ), 为大戟科大戟属植物, 在我国主要生长于内蒙古、东北及河北等地区。其根入药为中药狼毒，是一种传统的中药材[1]。狼毒始载于《神农本草经》，列为下品，其味苦、辛，性平，有毒，具有泄水逐饮，破积杀虫的功效，主治水肿腹胀，痰食虫积，心腹疼痛，结核，疥癣等[2]。为进一步开发研究狼毒大戟的药用价值，开发植物资源的综合利用，本文对干燥的狼毒大戟根部无水乙醇浸泡液石油醚萃取物化学成分进行了研究。从中分离得到4种单体化合物，并对其结构进行了鉴定，分别为岩大戟内酯A、岩大戟内酯B、17-羟基岩大戟内酯A和17-羟基岩大戟内酯B。

1材料与仪器

BrukerAM-600 型核磁共振波谱仪(TMS 为内标)；美国Waters公司高效液相色谱仪；柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂产品(200目～300目)；薄层色谱硅胶板为青岛海洋化工厂生产；索氏动态提取浓缩机组和多功能萃取罐由砥石机械生产；北京赛百奥科技有限公司生产的多功能暗箱紫外分析仪；所有分析纯试剂均为天津市富宇精细化工有限公司生产；色谱纯试剂为阿拉丁试剂厂生产。

实验所用狼毒大戟于 2013 年采自内蒙古自治区，将根部剪粹后室内阴干，经齐齐哈尔医学院中药教研室郭丽娜教授教授鉴定为为EuphorbiaFischerianaSteud.，标本收藏于齐齐哈尔医学院医药科学研究院药用植物成分研究室。

2提取与分离

将干燥狼毒大戟根部28.92 kg，用无水乙醇浸泡提取5次，过滤合并提取液，减压浓缩得深棕色粗浸膏。用水将该粗浸膏制成悬浮液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压蒸馏至恒重，分别得到石油醚萃取物1.08 kg、乙酸乙酯萃取物0.7 kg和正丁醇萃取物0.2 kg。

取石油醚层萃取物1.08 kg，用硅胶柱色谱、HPLC、重结晶等方法分离纯化得到化合物1(2.01 g)，化合物2(1.04 g)，化合物3(1.36 g)，化合物4(1.77 g)。

3结果与讨论

3.1 结构鉴定

化合物1：无色雪花状晶体(石油醚)，

1H-NMR (600MHz,CDCl3), δ:0.72(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.05(3H,s),2.63(1H,d,J=5.4Hz),3.70(1H,s),5.45(1H,d,J=5.4Hz)。

13C-NMR(600MHz,CDC13),δ:8.68(C-17),15.02(C-20),18.46(C-2),20.89(C-6),21.93(C-19),33.51(C-18),33.54(C-4),34.17(C-7),39.90(C-3),41.45(C-10),41.54(C-1),51.87(C-9),53.53(C-5),54.51(C-14),61.21(C-8),104.12(C-11),125.23(C-15),145.04(C-13),147.50(C-12),170.65(C-16)。以上数据与文献报道基本一致[3]，故鉴定化合物1 为jolkinolide A。

化合物2：无色针状晶体(甲醇)。

1H-NMR (600 MHz, CDCl3), δ:0.83(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.08(3H,s),2.29(1H,s),3.68(1H,s),4.04(1H,s,)。

13C-NMR(600MHz,CDCl3)δ:8.58(C-17),15.27(C-20),18.27(C-2),20.37(C-6),21.72(C-19),33.32(C-18),33.37(C-4),35.47(C-7),39.00(C-1),39.07(C-10),41.13(C-3),47.85(C-9),53.34(C-5),55.19(C-14),60.79(C-8),65.91(C-11),85.05(C-12),130.13(C-15),148.44(C-13),169.45(C-16)。以上数据与文献报道基本一致[4]，故鉴定化合物2为jolkinolideB。

化合物3：无色针状晶体(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.74(3H, s); 0.86(3H, s), 0.95(3H, s), 2.66(1H, d, J=5.4 Hz), 4.04(1H,d,J=5.4Hz), 4.65(2H, s),5.58 (1H, d, J=5.4 Hz)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.13(C-20),18.46(C-2), 20.85(C-6), 21.93(C-19), 33.50(C-18), 33.56(C-4), 34.00(C-7), 39.94(C-1), 41.52(C-10), 41.53(C-3), 51.81(C-9),53.55(C-5),54.46(C-14), 56.37(C-17), 61.33(C-8), 106.55(C-11),127.43(C-15),146.65(C-13), 147.35(C-12),169.24(C-16)。

以上数据与文献报道基本一致[5]，故鉴定化合物3为17-hydroxyjolkinolideA。

化合物4：无色针状晶体(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.80(3H,s), 0.80(3H,s), 0.88(3H, s), 2.30(1H, s),3.24(1H,s),4.02(1H,s),4.14(1H,s)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.47(C-20),18.42(C-2),20.82(C-6),21.88(C-19),33.45(C-18),33.53(C-4),35.55(C-7),39.06(C-1),39.24(C-10),41.28(C-3),47.89(C-9),53.54(C-5),55.29(C-14),56.51(C-17),61.57(C-11),66.84(C-8),85.41(C-12),133.51(C-15),150.80(C-13),168.19(C-16)。

以上数据与文献报道基本一致[6]，故鉴定化合物4为17-hydroxyjolkinolide B。

3.2 讨论

干燥的狼毒大戟根部28.92 kg，粉碎后利用无水乙醇30 ℃恒温浸泡提取，合并浸提液浓缩至小体积，加水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到石油醚萃取物(1.08 kg),乙酸乙酯萃取物(0.7 kg),正丁醇萃取物(0.2 kg)。三种萃取物占狼毒大戟根部的质量分数分别为：3.7%、2.4%和0.7%。从石油醚萃取物中分离得到4个化合物，通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物的结构。分别鉴定为：岩大戟内酯A、岩大戟内酯B和17-羟基岩大戟内酯A、17-羟基岩大戟内酯B。

[1] 俞媚华,侯爱君.狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究[J].中国中药杂志,2010,35(22):3 002～3 005.

[2] 南京中医药大学.中药大辞典.下册[M].上海科学技术出版社,2006:2 549.

[3] 马良,王欢,王金兰,等. 狼毒大戟地上部分化学成分研究 [J]. 齐齐哈尔大学学报, 2012,28(6): 27～29.

[4] 刘桂芳, 付玉琴, 杨志强,等.狼毒大戟抗癌活性成分二萜内酯的分离鉴定[J] .中药通报,1988, 13:291～292.

[5] 刘文粢, 马晴高, 秦国伟, 等.狼毒大戟的化学成分研究[Ⅱ] [J] .中草药, 2004,35(3):260.

[6] 潘勤,施敏峰,闵知大.狼毒大戟中4 中Jolkinolide型二萜的二维核磁共振研究[ J] .中国药科大学学报,2004, 35:16～19.