沉默Calnexin 基因表达对胃癌细胞SGC- 7901 内质网应激凋亡及其信号通路的影响

张晓海 张洪涛 胡孝定 钟华

沉默Calnexin 基因表达对胃癌细胞SGC- 7901 内质网应激凋亡及其信号通路的影响

张晓海 张洪涛 胡孝定 钟华

目的探讨沉默钙连蛋白（Calnexin）基因对胃癌细胞SGC-7901内质网应激凋亡信号通路的影响。方法构建靶向Calnexin基因的慢病毒干扰载体，利用包装细胞293T获得重组慢病毒，转染人胃癌SGC-7901细胞，并分为转染shRNA-Calnexin的实验组，转染shRNA空白质粒的空白载体组，并将未转染的SGC-7901细胞作为对照组。应用RT-PCR技术检测靶向沉默Calnexin的表达，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测各组细胞增殖情况；流式细胞术检测各组细胞凋亡情况；Western blot检测GRP94、IRE1、ATF6及CHOP表达水平。结果转染shRNA沉默Calnexin基因可明显下调Calnexin mRNA的表达，实验组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；MTT法检测实验组细胞转染后细胞增殖能力明显下降（P＜0.05）；沉默Calnexin基因可提高细胞凋亡率，转染72h后实验组与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；沉默Calnexin基因使胃癌细胞中GRP94、IRE1、ATF6及CHOP蛋白表达水平明显升高（均P＜0.05）。结论靶向沉默Calnexin基因抑制人胃癌细胞增殖和促进细胞凋亡可能是通过抑制内质网应激信号通路实现的。

钙连蛋白 SGC-7901 细胞 慢病毒 内质网应激 凋亡 胃癌

在我国每年大约有50万新发胃癌患者，病例数占全球的1/2，胃癌在恶性肿瘤中发病率、死亡率均为第3位。目前我国对于胃癌的治疗手段主要为手术治疗及化疗，但上述治疗方法并不能达到患者及医生的期望疗效，且具有5年生存率低、不良反应大等特点[1]。钙连蛋白（Calnexin）是内质网中的I型跨膜蛋白，具有辅助糖蛋白折叠装配、监控内质网折叠蛋白质量、调节细胞内Ca2+稳态和缓解内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）等作用[2]。……