免疫接种和复方中药超微粉联用预防肉鸡呼吸道疾病的观察

王巧红，吕朝辉，胡丹，顾建明

(1．启东市动物疫病预防控制中心，江苏启东226200;2．海门泰森禽业发展有限公司，江苏海门226151)

免疫接种和复方中药超微粉联用预防肉鸡呼吸道疾病的观察

王巧红1，吕朝辉2，胡丹1，顾建明1

(1．启东市动物疫病预防控制中心，江苏启东226200;2．海门泰森禽业发展有限公司，江苏海门226151)

为研究免疫接种和复方中药超微粉联用预防肉鸡呼吸道疾病的机制。本研究选择1日龄Cobb500肉鸡1 000羽，随机分为5个试验组，:试验组1和试验组2在基础日粮基础上添加0．5%中药超微粉，试验组3和试验组4按照每公斤体重0．5 g添加10%阿莫西林可溶性粉，试验组5不添加任何药物。试验组1和试验组3在基础免疫基础上加免鸡传染性支气管炎疫苗和新流二联疫苗，试验组2、试验组4和试验组5仅进行基础免疫。分别于14日龄、28日龄、42日龄测定血清中IL-1β、IL-2、TNF和INF-γ含量，ND和AI(H5亚型Re-6和Re-7)抗体。结果表明，免疫接种和中药超微粉联用可保护肉鸡消化道、呼吸道，促进免疫器官发育，能显著提高血清中的抗体水平和细胞因子的含量。表明二者联用通过调节机体的细胞免疫和体液免疫，从而对机体产生保护作用，以达到对肉鸡呼吸道疾病的防控效果。

免疫;接种;中药超微粉;呼吸道疾病;肉鸡呼吸道疾病

随着人们生活水平的提高，对肉、奶、蛋的需求量也日益增多，同时对产品质量和安全提出了更严格的要求，但动物疫病防控日益复杂化，呼吸道疾病是制约肉鸡健康发展的重要因素。引起呼吸道疾病的病原种类繁多，同时加上鸡特殊的呼吸道结构，气囊多且分布广，易感染且治疗困难。病毒性疾病一旦发生很难控制，免疫接种是最直接和有效的防控手段。近年来抗生素在动物疫病防控方面的长期、大量使用及滥用，导致细菌耐药性产生、药物残留和二次污染等问题日益突出。因此探讨有效的防控措施是势在必行，本试验通过给肉鸡进行免疫接种，同时在日粮中添加复方中药超微粉，观察肉鸡呼吸道疾病发生情况，对血清中抗体水平和细胞因子含量的影响，为肉鸡呼吸道疾病的防控提供参考依据。

1 材料与方法

1．1 疫苗、药品疫苗:鸡新城疫活疫苗，辽宁益康生物股份有限公司生产，批号201203;传染性支气管炎活疫苗，山东信得科技股份有限公司生产，批号201207001;鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(Lassota株+F株)，梅里亚公司生产，批号12102695;禽流感灭活疫苗(H5，Re-6+Re-7株)梅里亚公司生产，批号12112707。

药品:复方中药超微粉:黄芪150 g、麦芽300 g、穿心莲100 g、党参200 g、女贞子250 g，合计1 000 g，进行超微粉粉碎。10%阿莫西林可溶性粉(批号2014060102)，河南省康星药业股份有限公司生产。

1．2 试验动物及试验设计1日龄健康Cobb500雏鸡1000只，随机分为5个试验组，每组10个重复，每个重复20只鸡。分组情况如下:试验组1和试验组2在基础日粮基础上添加0．5%中药超微粉，试验组3和试验组4按照每公斤体重0．5 g添加10%阿莫西林可溶性粉，试验组5不添加任何药物。中药组1～7日龄连续用药7 d，间隔15 d，23～27日龄再连续用药5 d，西药组1～4日龄饮水用药，21～24日龄再饮水用药，连续用药4 d。试验组1和试验组3的免疫程序为9日龄新城疫疫苗和鸡传染性支气管炎疫苗混合，滴鼻或点眼，0．06 mL/羽，禽流感疫苗和新流二联疫苗混合，皮下注射，0．5 mL/羽;试验组2、试验组4和试验组5的免疫程序为9日龄新城疫疫苗，滴鼻或点眼，0．03 mL/羽，禽流感疫苗皮下注射，0．25 mL/羽。饲养期间鸡群自由采食和饮水。

1．3 检测项目和方法

1．3．1 在整个试验期观察各试验组肉鸡的临床症状、剖检变化。

1．3．2 分别在14、28日龄和42日龄检测各试验组肉鸡血清中IL-1β、IL-2、INF-γ和TNF的含量，采用放射免疫法;抗体效价检测:采用血凝试验和血凝抑制试验。

1．4 主要仪器JY2002型电子天平，上海分析仪器厂生产;TGL-16G-C型高速离心机:上海安亭科学仪器厂。

1．5 统计学分析采用SAS6．0统计学软件与Excel对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2．1 临床症状及剖检变化在整个试验期，试验组1鸡群精神正常，羽毛光亮，粪便正常且未见明显的呼吸道症状，肠壁和气管、支气管、气囊均未见异常，其他试验组均有不同程度的损伤。在剖检时发现试验组1免疫器官均较其他试验组大。

2．2 对血清中IL-1β和IL-2含量的影响见表1。

表1 对血清中IL-1β和IL-2含量的影响(ng/mL)

由表1可知，血清中IL-1β和IL-2含量，在14日龄时，除试验组1与试验组2、试验组3与试验组4之间差异不显著(P＞0．05)，试验组3、试验组4与试验组5之间差异显著(P＜0．05)外，其余各试验组间差异均极显著(P＜0．01);在28日龄和42日龄时，除试验组1与试验组2、试验组3与试验组4之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组之间差异均极显著(P＜0．01);。随着试验期延长，血清中IL-1β和IL-2含量也升高，试验组1、2含量均高于其他试验组，以试验组1含量最高。

2．3 对血清中TNF和IFN-γ含量的影响见表2。

表2 对血清中TNF和IFN-γ含量的影响(ng/mL)

表3 对血清中ND抗体水平的影响

由表2可知，血清中TNF含量，在14、28日龄和42日龄，除了试验组1与试验组2、试验组3、试验组4与试验组5之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组差异均极显著(P＜0．01)。血清中IFN-γ含量，除了试验组1与试验组2、试验组3与试验组4之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组之间差异均极显著(P＜0．01)。随着试验期延长，血清中TNF和IFN-γ含量也升高，试验组1、2含量均高于其他试验组，以试验组1含量最高。

2．4 对血清中ND抗体水平的影响见表3。

由表3可知，14日龄时，除试验组1和试验组3试验组2、4、5之间差异不显著(P＞0．05)外，其余试验组之间差异均极显著(P＜0．01);28日龄时，除试验组1和试验组3、试验组4和试验组5之间差

异不显著外其余各试验组之间的差异均极显著(P＜0．01);在42日龄时，除试验组2与试验组3、试验组4与试验组5之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组之间的差异均极显著(P＜0．01)。

2．5 对血清中禽流感H5亚型Re-6抗体和Re-7抗体的影响见表4。

表4 对血清中禽流感H5亚型Re-6抗体和Re-7抗体的影响

由表4可知，Re-6和Re-7抗体，在14日龄时，各试验组之间差异均不显著(P＞0．05);在28日龄时，除试验组1与试验组3、试验组4与试验组5之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组之间差异均极显著(P＜0．01);在42日龄时，除试验组2与试验组3、试验组4与试验组5之间差异不显著(P＞0．05)外，其余各试验组之间差异均极显著(P＜0．01);在28日龄时，各试验组抗体水平均在有效抗体保护范围内，在42日龄时，只有试验组1处于有效抗体保护范围内。

3 讨论

3．1 免疫接种和中药超微粉联用对肉鸡血清中细胞因子的影响细胞因子是具有很强功能的蛋白介质，由免疫细胞分泌并参与机体免疫应答，细胞分化、调控造血，肿瘤免疫等多种生理和病理过程。主要包括:白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFN)等。IL-1是一组主要起免疫调节作用的激素样肽类物质。IL-2是T细胞的自分泌或旁分泌因子，其主要生理功能是促进T淋巴细胞的增殖和分化。TNF主要由激活的单核巨噬细胞分泌产生，T细胞、B细胞及神经细胞也是其分泌细胞［1］。TNF具有双重作用，在正常情况下，其具有抗肿瘤、抗感染和促进组织修复等重要作用，对机体有利，若持续释放，则会引起机体发热、休克、恶病质和组织损伤［2］。TNF可以选择性溶解感染病毒的细胞以限制病毒增殖［3］，IFN具有抗病毒、抗增殖活性、能保护细胞免受病毒感染，对正常细胞具有重要的抗增生活性［4］。王萌等［5］采用自拟中药方剂防治鸡传染性支气管炎，结果表明，中药方剂可持续诱生IFN-γ和TNF-β，发挥了免疫调节机能，从而对机体产生免疫保护，达到对鸡传染性支气管炎的防治效果。钢强等［6］用三叶青提取物对小鼠进行灌胃，结果表明，三叶青能明显提高小鼠免疫功能和TNF-α、IFN-γ指标。陈培荣等［7］研究的蛇附子对肉鸡免疫功能的影响，结果显示，蛇附子可以提高鸡的细胞因子水平和免疫器官指数，具有免疫增强作用。本试验结果显示，通过给肉鸡进行免疫注射和饲喂复方中药超微粉，呼吸道病发生率降低，肠道和呼吸道结构正常，免疫器官增大，血清中IL-1β、IL-2、INF-γ和TNF的含量均高于其他试验组。与上述结果一致。

3．2 免疫接种和中药超微粉联用对肉鸡抗体水平的影响动物机体抗体水平的高低是反映机体对抗病源保护能力的重要指标，也是评价免疫效果的重要手段。司昌德等［8］研究表明，黄芪可提高肉鸡血清中ND抗体水平。顾建明等［9］采用复方中药超微粉饲喂肉鸡结果显示，0．5%中药超微粉能显著提高肉鸡的脏器系数，提高血清ND、Re-6、Re-7抗体水平。本试验结果显示，通过给肉鸡免疫接种和饲喂复方中药超微粉能提高血清中抗体水平，而且均高于其他试验组，与以上结果一致。

综上所述，通过给肉鸡进行免疫接种和饲喂复方中药超微粉，可保护肠道和呼吸道结构的完整性，促进免疫器官发育，进而促进机体持续释放细胞因子，发挥细胞免疫调节作用，同时，促进机体抗体产生和延长维持时间，体液免疫和细胞免疫双重保护进而达到对肉鸡呼吸道疾病的防控效果。

［1］杨金升．肿瘤坏死因子在脑卒中时的表达及作用［J］．国外医学脑血管疾病分册，1996，4:77．

［2］包兴吕．肿瘤坏死因子与脑缺血［J］．现代健康，2000，10:4．

［3］陈鸿珊，张兴权．抗病毒药物及其研究方法［M］．北京:化学工业出版社，2006:262-263．

［4］谭锦泉，黄土昂，张秋萍．治疗免疫学［M］．北京:科学出版社，2007:113-114．

［5］王萌，严作廷，叶得河，等．自拟中药方剂对鸡传染性支气管炎的防治效果［J］．西北农林科技大学学报，2011，39(12):8-14．

［6］陈培荣，李洵．蛇附子对肉鸡细胞因子及免疫器官发育的影响［J］．河南农业科学，2015，44(5):134-137．

［7］钢强，徐彩菊，孟佳，等．三叶青对小鼠细胞因子及免疫功能影响的研究［J］．中国卫生检验杂志，2008，18(9):1724-1726．

［8］司昌德，闵亚宏．黄芪多糖对肉仔鸡免疫功能的影响［J］．中国预防兽医学报，2008，30(12):978-980．

［9］顾建明，王巧红，吕朝辉，等．复方中药超微粉对肉鸡免疫功能的影响［J］．中兽医医药杂志，2015(6):43-46．

S858．31

B

0529-6005(2017)01-0060-03

2016-04-07

2014年江苏省农业三新工程项目〔SXGC(2014)112〕

王巧红(1982-)，女，兽医师，硕士，研究方向为中草药饲料添加剂在动物疫病预防中的作用，E-mail:wqhwch@163．com