肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响

冷光朋， 刘开祥， 李 浩， 廖小明， 安 祥， 李 偲， 杨 阳

肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响

冷光朋1， 刘开祥1， 李 浩1， 廖小明2， 安 祥1， 李 偲1， 杨 阳1

目的 探讨肢体缺血预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响。方法 将60只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体缺血预处理组(LIPC组)、3-甲基嘌呤组(3-MA组)，每组15只。制作脑缺血再灌注、肢体缺血预处理及3-MA干预大鼠模型，在脑缺血2 h再灌注24 h后进行神经功能缺陷评分和脑梗死体积测定，HE染色观察细胞形态学改变，Western Bloting法检测自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表达。 结果 与I/R组比较，LIPC组神经功能缺陷评分降低(P<0.05)，脑梗体积明显减小(P<0.05)，细胞损伤、坏死减轻(P<0.05)，Beclin-1、Cathepsin B的蛋白表达明显减弱(P<0.05)。结论 LIPC对缺血再灌注损伤大脑具有保护作用，其机制可能与减弱自噬水平有关。

脑缺血； 肢体缺血预处理； 自噬； Beclin-1； Cathepsin B

缺血性脑卒中是一种复杂的多因素疾病，传统的恢复缺血区域的血流灌注，会导致缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury，I/R)，在这种情况下，需要对新的神经保护措施进行探索。肢体缺血预处理(limb ischemic preconditioning，LIPC)，是指预先给予肢体反复短暂的缺血再灌注，激发机体的内源性保护机制，以提高组织耐受随后持续较长时间缺血的能力，减轻脏器损伤的现象[1]。研究发现，LIPC对缺血再灌注损伤大脑有保护作用，但它的可能作用机制却有待深入研究。

自噬(autophagy)是一种溶酶体参与的物质分解代谢过程，主要降解细胞内受损、变性或衰老的蛋白质，以胞质内出现自噬体为标志的细胞自我消化过程[2]。自噬作为一条重要的蛋白降解途径，在I/R中参与的复杂调控机制已经成为神经系统疾病研究的热点。本实验通过建立大鼠脑缺血再灌注模型，观察LIPC对损伤大脑自噬相关因子的影响，为进一步研究LIPC的作用机制提供参考。……