基于总皂苷临床利用量的麦冬质量评价研究

徐玉玲， 徐腾达， 将天宇， 寇 强， 陈如雪， 邓燕君

(成都大学 药学与生物工程学院， 四川 成都 610106)

基于总皂苷临床利用量的麦冬质量评价研究

徐玉玲， 徐腾达， 将天宇， 寇 强， 陈如雪， 邓燕君

(成都大学 药学与生物工程学院， 四川 成都 610106)

基于麦冬总皂苷的临床利用量对麦冬的品质进行评价研究.采用正交实验法优选麦冬中总皂苷的最佳提取工艺，根据最佳提取工艺采用UV法测定4批麦冬中总皂苷的含量，从而计算其临床利用量.麦冬总皂苷最佳提取工艺为，8倍量60%乙醇提取3次，每次1.5 h；4批麦冬总皂苷临床利用量(g/100 g)分别为，0.166 g，0.213 g，0.226 g，0.178 g.结果表明，建立的方法符合中药材成分复杂的特点，并与临床利用相关的评价方法，为麦冬中药材品质评价研究提供了一种新的思路.

麦冬；总皂苷；临床利用量；质量评价

0 引 言

麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬的肉质块茎[1]，主产于浙江、四川等地，为常用中药品种，临床上常用于治疗冠心病、心绞痛等症[2].麦冬所含总皂苷现已被《中国药典》2015版第一部及相关文献列为麦冬主要质量控制指标之一[3].中药成分临床利用量，是指药材成分在临床应用时，药材中的化学成分可被临床使用时利用的量.基于中药成分临床利用量的中药材药用品质评价指标，符合中医药临床应用特点，是体现中药特色的中药品质评价方法,该方法可为丰富中药材品质评价理论提供新的研究思路和方法，能保证药材的临床应用疗效[4].目前，未见对麦冬的品质采用化学成分临床利用量进行评价的相关研究报道,对此，为了探索麦冬临床利用量与现行指标之间的差异，本研究进行了相关工作.

1 试药与仪器

1.1 试 药

实验所用试药包括：麦冬(产地四川，批号，20151210、20160407、20160407；产地湖北，批号，20160407)，购自于四川成都市荷花池药材批发市场，经成都大学刘涛研究员检验为百合科沿阶草属植物麦冬的肉质块茎，共4个样品；鲁斯可皂苷元对照品(批号，151220，纯度>98%)，购自于四川维克奇生物科技有限公司，甲醇(批号，20160124)、正丁醇(批号，20160121)、氨水(批号，20151102)、高氯酸(批号，20151021)、95%乙醇(批号，20151002)，均购自于成都市科龙化工试剂厂；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯.

1.2 仪 器

实验所用仪器包括：TU-1810型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，HH-6型数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)，BS-6KH型电子天平(上海友声衡器有限公司) ，FA2004型电子分析天平(上海良平仪器仪表有限公司).

2 麦冬总皂苷最佳提取工艺研究

2.1 麦冬原药材总皂苷测定方法

2.1.1 供试品溶液的制备.

取麦冬细粉约3 g，精密称定，精密加入甲醇50 mL，加热回流2 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过.精密量取续滤液25 mL，回收溶剂至干，残渣加水10 mL溶解，再用水饱和正丁醇振摇，提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，用氨液洗涤2次，每次5 mL，弃去氨液.正丁醇液蒸干，残渣用80%甲醇溶解，转移至50 mL量瓶中，加80%甲醇至刻度线，摇匀，精密量取供试品溶液2～5 mL，置10 mL具塞试管中，水浴挥干溶剂，精密加高氯酸10 mL，摇匀，置热水中保温15 min，取出，冷水冷却，在397 nm波长下测定吸光度.

2.1.2 对照品溶液的制备.

取鲁斯可皂苷元对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，作为对照品溶液.

2.1.3 标准曲线的制备.

精密量取对照品溶液0.5、1、2、3、4、5、6 mL，分别置具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，精密加人高氯酸10 mL，摇匀，置热水中保温15 min，取出，冰水冷却，以相应的试剂为空白，按照紫外—可见分光光度法，在397 nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为，

Y=0.0183X+0.01135，r=0.9995.

2.2 麦冬提取液总皂苷测定方法

2.2.1 单因素实验.

取麦冬4份，每份50 g，置于烧瓶中，分别加10倍水，40%、60%、80%乙醇，加热回流2 h，提取后滤过，待滤液冷却至室温，测定体积，摇匀，精密量取滤液25 mL，水浴蒸干，残渣加水10 mL使溶解.用水饱和正丁醇振摇提取5次，每次10 mL，合并正丁醇液，再用氨试液洗涤2次，每次5 mL，弃去氨液，蒸干正丁醇，残渣用甲醇溶解，转移至50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度线，摇匀，精密量取供试品3 mL，置10 mL具塞试管中，于水浴中挥干溶剂，精密加入高氯酸10 mL，摇匀，置70～80 ℃水中保温15 min取出，冰水冷却，作为供试品，采用UV法测定麦冬总皂苷含量，结果见表1.

表1 单因素实验结果

单因素实验结果表明，麦冬总皂苷提取方法采用60%乙醇提取为佳.

2.2.2 正交实验.

1)提取条件选择.为考察麦冬总皂苷制备条件，取每份50 g麦冬以总皂苷含量为指标做L9(34)正交实验.实验因素分别为，60%乙醇溶媒量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)，因素水平如表2所示.

表2 实验因素水平

2)正交实验与结果.按照正交实验设计表，按照“2.1.1”项下方法进行含量测定，以总皂苷为指标进行分析，实验结果见表3，方差分析见表4.

表3 正交实验设计与结果L9(34)

表4 方差分析表

注：F0.05(2，2)=19，F0.01(2，2)=99.

由表3可知，溶媒量、提取次数及提取时间3个因素对麦冬总皂苷的提取影响程度不同，R值大小依次为RC>RA>RB，提取次数对于含量的影响最大.由表4方差分析可知，提取次数(C)对实验结果有显著性差异，提取时间(B)和溶媒量(A)对实验结果无显著性差异.根据此分析结果，本研究选择最佳提取工艺为，A2B2C3，即用8倍量60%乙醇提取3次，每次1.5 h.

2.2.3 验证实验.

根据正交实验所得最佳提取工艺，以每份50 g麦冬对其进行3组平行验证实验，所得麦冬总皂苷的含量分别为，80.56 mg、81.72 mg及85.12 mg(RSD=3.5%).结果表明，正交实验所得最佳工艺稳定可行.

2.3 总皂苷含量、提取转移率及临床利用量测定

按照《中国药典》2015版第一部麦冬项下相关方法测定4批样品的总皂苷含量、提取转移率及临床利用量，测定结果见表5.

表5 4批麦冬总皂苷测定结果

注：临床利用量=100 g×药材含量×含量转移率.

由表5可知，20151210批次麦冬总皂苷含量最高，为0.315%.20160407批次麦冬总皂苷含量最低，为0.266%.20151210批麦冬总皂苷临床利用量最高，为0.226 g/100 g，20160407批次麦冬总皂苷临床利用量最低，为0.166 g/100 g.

3 结 语

本研究表明，麦冬总皂苷含量和临床利用量具有一致性，所以对于麦冬品质评价可通过麦冬总皂苷含量或麦冬总皂苷临床利用量这2个指标来进行评价.基于麦冬中药材用于临床用药，建议以临床利用量进行考察麦冬品质.总体来看，中药成分临床利用量不仅可以反映药材含量和转移率的高低，同时对该成分在临床上实际被利用的情况具有重要参考价值.此外，现行药材质量标准多以化学成分含量高低来对药材进行质量评价，此评价与其是否在临床中被应用之间相关性不强.例如，刘涛等[5]在评价黄芩质量时发现，黄芩苷的含量与临床利用量差异明显，徐玉玲等[6]测定黄柏中盐酸小檗碱的药材含量较高，而临床利用量却较低，含量与临床利用量不具一致性.中药成分临床利用量是联系药材成分的含量和提取利用率的一种量化指标，在一定程度上能够表征药材的临床实际效用.因此，该方法对药材某一临床功效进行质量评价有一定的意义，但对药材整体进行质量评价，涉及权重系数的比重问题，有待结合药效进行综合讨论.另外，本实验中样品批次较少，对实验结果可能有一定影响，有待进一步验证.

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社，2015.

[2]袁春丽,孙立,袁胜涛.等.麦冬有效成分的药理活性及作用机制研究进展[J].2013(22)：212-214.

[3]曹原湘,张兴国一,杨言探.麦冬质量控制技术的研究[J].安徽农业科学，2009(37):33-36.

[4]刘涛,苟小军,万德光.等.基于“中药成分临床利用率"的中药材药用品质评价模式的商建[J].中草药,2015(13):1863-1866.

[5]刘涛,张蕾,刘婷.等.不同产地黄芩中的黄芩苷提取转移率研究[J].成都大学学报(自然科学版),2014,33(1):8-10.

[6]徐玉玲,吴南轩,李鹏程.等.基于化学成分临床利用量的不同产地黄柏质量评价[J].中国测试，2016(12):45-48.

Evaluation Research on Ophiopogon Japonicus Quality Based on Clinical Utilization Amount of Total Saponins

XUYuling,XUTengda，JIANGTianyu，KOUQiang，CHENRuxue，DENGYanjun

(School of Pharmacy and Bioengineering, Chengdu University, Chengdu 610106, China)

The paper is going to evaluate the quality of ophiopogonin japonicus based on the clinical utilization amount of saponins.The optimum extraction process of total saponins in ophiopogon japonicus are optimized by orthogonal experiments.Based on the optimum extraction process,UV method is used to measure the content of total saponins in the 4 batches of ophiopogon japonicus in order to calculate the accurate amount for clinical use.The results show that the optimum extraction process of total saponins of ophiopogon japonicus is 8 times the amount of 60% ethano,extract 3 times,each time 1.5 h.The clinical utilization amount of the total saponins of ophiopogonin japonicus from those 4 batches e(g/100 g) are 0.166,0.213,0.226,0.178 g respectively.The conclusion drawn from the study is that the method established in this paper conforms to the characteristics of Chinese herbal medicine with complex composition.The method is also related to clinical use.It provides a new way to evaluate the quality of medicinal materials in ophiopogon japonicus.

ophiopogon japonicus;clinic utilization amount;quality evaluation

1004-5422(2017)01-0012-03

2016-12-28.

徐玉玲(1975 — )， 女， 硕士， 副教授， 从事中成药新药开发与中药质量再评价研究.

R284.2；R286.07

A