仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响

王晓敏 宣锦 卢芳国++田维毅 杨娟��蔡琨

【摘要】目的：观察仙茅多糖对体外培养的巨噬细胞分泌几种活性因子的影响，以期探索仙茅多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法：将仙茅多糖体外与RAW2647巨噬细胞共同培养36h，ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1的含量，Griess比色法检测培养上清中NO的含量。结果：与空白对照组比较，仙茅多糖高、中剂量组TNF-α、IL-1和NO等活性因子的水平明显升高（P<005或P<001），且与阳性对照组的调节趋势相似。结论：仙茅多糖刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1和NO等活性因子可能是其活化巨噬细胞的重要机制。

【关键词】仙茅多糖（COP）；巨噬细胞；活性因子；肿瘤坏死因子-α；一氧化氮；白介素-1

【中图分类号】R2855【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）07-0032-04

The Effect of Polysaccharide Extracted from Curculigo Orchioides Gaertn on Several Active Factors in RAW2647 Cells

WANG Xiaomin1XUAN Jin1LU Fangguo3TIAN Weiyi1YANG Juan2*CAI Kun1，3*

1.Guiyang college of traditional Chinese medicine，Guiyang 500025，China；2. Natural products chemistry，Chinese academy of sciences key laboratory of guizhou province，Guiyang 550002，China；3.Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410208，China

Abstract：Objective To investigate the effect of Polysaccharide extracted from Curculigo Orchioides Gaertn（COP） on several active factors in RAW2647 cells and explore the partial mechanism of how COP activates macrophages.Methods Macrophages co-culture with COP for 36h in vitro. TNF-α and IL-1 production of the cells induced by COP were measured by ELISA.NO production in supernatant was measured by Griess reagent.Results Compared with normal control group，COP significantly increased TNF-α、IL-1和NO production （P<005 or P<001）in 12500 and 6250μg/mL COP groups.And its adjustment trend is similar with the LNT group.Conclusion The effect of COP on these active factors in RAW264.7 cells may be the most important mechanism of how it activates macrophages.

Keywords：COP；Macrophages； Active Factors；TNF-a； NO ；IL-1

研究表明，多數中药多糖类成分具有较好的免疫调节作用，且相对毒性较低，是开发免疫调节制剂的较好来源[1-6]。中药仙茅为石蒜科多年生草本植物仙茅（Curculigo orchioides Gaertn）根茎，具有补肾助阳、益精血、强筋骨、行血消肿等功效，主要用于肾阳不足、虚劳内伤等症[7]，是贵州苗族人民常用的一种药物。仙茅多糖（Curculigo orchioides Gaertn polysaccharide，COP）是从仙茅中经水提醇沉后得到，前期研究发现，COP具有调节免疫、抗氧化作用[8-9]，并观察到COP可以增强环磷酰胺所致的免疫低下小鼠模型的免疫功能，且对小鼠腹腔巨噬细胞的作用尤为显著，但机制尚不清楚。巨噬细胞作为机体重要的抗原提呈细胞，其分泌的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、一氧化氮（NO）等活性因子，是巨噬细胞参与特异性免疫应答的重要物质基础[10-14]。为了研究COP对巨噬细胞功能的调节机制，研究主要观察COP对小鼠RAW2647巨噬细胞释放TNF-α、IL-1、NO等活性因子的影响。香菇多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老作用且具有组分单一、质量稳定、疗效好、毒副作用小等优点[15]，它具有激活巨噬细胞的能力，并且已经被广泛应用于国内外临床，故研究选取其为阳性对照药物。……