青蒿不同部位总RNA提取方法比较

2017-05-02 11:29:29周敏付金娥韦树根潘丽梅
江苏农业科学 2017年3期

周敏 付金娥 韦树根 潘丽梅

摘要:为从青蒿中提取高质量的RNA,以青蒿叶片、茎、根和花为材料,采用TRIzol法、改良TRIzol法、十六烷基三甲基溴化铵-LiCl(CTAB-LiCl)法、CTAB-异丙醇法4种方法,比较不同材料不同方法分离RNA的效果。结果表明,4种方法所提RNA纯度均较高,其中改良TriZol法所提RNA质量最好。

关键词:青蒿;RNA提取;改良TRIzol法;蛋白质

中图分类号: Q522文献标志码: A

文章编号:1002-1302(2017)03-0031-02

收稿日期:2015-09-29

基金项目:國家自然科学基金(编号:81560623);广西自然科学基金(编号:2013GXNSFAA019221、2013GXNSFBA019180)。

作者简介:周敏(1991—),女,江西赣州人,硕士研究生,主要从事药用植物资源育种方面研究。E-mail:zmlww1020@163.com。

通信作者:韦树根,硕士,副研究员,主要从事药用植物资源、繁殖、育种等方面的研究。E-mail:weishugen2@163.com。

2015版《中华人民共和国药典》规定,青蒿为菊科植物黄花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分[1]。青蒿苦、辛、寒,具有清虚热、除骨蒸、解暑热、截疟、退黄的功效,多用于治疗温邪伤阴、夜热早凉、阴虚发热、骨蒸劳热、暑邪发热、疟疾寒热、湿热黄疸等疾病。随着青蒿素被发现是治疗疟疾的首选药物,挽救了全球特别是发展中国家数百万人的生命,使得青蒿一直以来是研究的热点。目前青蒿的研究不仅从资源、栽培、育种等传统技术方面进行,还从分子生物学的角度阐明青蒿生长和发育机制及其有效成分青蒿素合成和累积机制等方面进行。因此,提取高质量、高纯度、完整性好的RNA是分子生物学研究的重要基础,对于进行逆转录PCR(RT-PCR),cDNA合成、RNA序列分析、Northern印迹杂交等具有重要意义。由于植物组织中化学成分复杂,并没有一种RNA提取方法适用于所有的植物[2]。……

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