河北医科大学第一医院
马国平 贾彦存△郝 娟△△王佳磊△△△杨 帆△△张 宇△△梁文杰△△(石家庄 050030)
化瘀解毒中药对梗阻性肾病大鼠肾脏类肝素酶表达的调控作用*
河北医科大学第一医院
马国平 贾彦存△郝 娟△△王佳磊△△△杨 帆△△张 宇△△梁文杰△△(石家庄 050030)
目的:观察化瘀解毒中药对梗阻性肾病大鼠肾脏类肝素酶(Hpa)表达的影响,以探索其拮抗炎症损伤的机制。方法:采用单侧输尿管结扎手术复制梗阻性肾病模型;采用real-timePCR技术检测肾组织HpamRNA的表达;采用SABC法检测肾组织Hpa蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾组织HpamRNA及蛋白表达上调(P<0.01);与模型组比较,中药组肾组织Hpa表达下降(P<0.01)。结论:化瘀解毒中药可下调梗阻性肾病大鼠肾脏Hpa表达从而减轻炎症损伤。
化瘀解毒中药;类肝素酶;梗阻性肾病;炎症损伤
在慢性肾脏病进程中,常伴随炎症反应及其导致的炎症损伤,而巨噬细胞及中性粒细胞等炎细胞的活化和浸润是肾组织炎症反应的重要病理特征。炎细胞浸润需穿越基底膜和细胞外基质(ECM),硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)是其主要成分之一,而类肝素酶(Hpa)可裂解HSPG的硫酸乙酰肝素(HS)侧链。故而Hpa促进细胞侵袭,在炎细胞浸润中起着极其重要的作用。本实验采用大鼠单侧输尿管结扎(UUO)方式,复制梗阻性肾病病变,给以化瘀解毒中药干预治疗,观察Hpa在UUO大鼠肾组织的表达,并观察化瘀解毒中药的调控作用,以探索炎症损伤的分子机制,从而为慢性肾脏病的中药治疗提供依据。
1.1 试剂及仪器 RNA提取试剂盒为美国Omega Bio-Tek公司产品,批号:00R6934010000L18O094;SYBR Green荧光定量PCR试剂盒为Vazyme Biotech Co.,Ltd产品,批号402151;Hpa抗体为美国Proteintech产品,批号00036315。实时荧光定量基因扩增仪,美国 Applied Biosystems 公司,型号:7500 Fast;……