马 迅 李鸿木# 王略力 陶 俊 林喜锋 华 平 熊利华*
缺氧条件下骨髓间充质干细胞对人冠状动脉内皮细胞自噬和凋亡的影响
马 迅1李鸿木1#王略力2陶 俊1林喜锋1华 平1熊利华1*
目的探索缺氧状况下MSC对内皮细胞自噬的诱导以及对早期凋亡率的影响。方法构建HCAEC与MSC间接共培养模型,实验分组:共培养组:MSC与HCAEC共培养;单独培养组:HCAEC单独培养;对照组:HCAEC使用与共培养组相同的培养基进行单独培养。上述各组分别予常氧(5%CO2,95%空气)和缺氧(1%O2,5%CO2,94%N2)培养24 h,Western blotting检测各组HCAEC细胞LC3蛋白和Beclin⁃1蛋白的表达量,RT⁃qPCR检测各组HCAEC细胞LC3基因和Beclin⁃1基因的表达水平,流式细胞术检测各组HCAEC细胞早期凋亡率。结果共培养组与单独培养组相比、以及缺氧组与常氧组相比,LC3蛋白和Beclin⁃1蛋白表达量均有升高(P<0.05)。各组间LC3基因和Beclin⁃1基因的表达水平没有检测到明显差异(P>0.05)。缺氧组中共培养组的早期凋亡率为(8.86%±1.48%),明显低于单独培养组(15.23%±2.56%)和对照组(14.49%±3.31%)(P<0.05)。结论MSC可以诱导HCAEC产生自噬,并在缺氧状况下改善HCAEC的生存状况,减少早期凋亡率。
缺氧;冠状动脉内皮细胞;骨髓间充质干细胞;共培养;自噬;凋亡
骨髓间充质干细胞(bone marrow⁃derived mes⁃enchymal stem cells,BMMSCs)是一群来源于骨髓组织、具有多项分化能力的非造血多能干细胞。此类细胞在经过分离培养和扩增后仍保留分化的潜能。近年来关于MSC生物治疗效应的研究十分火热,基于MSC低免疫原性、多分化性、体外易培养扩增及独特的归巢功能等多方面的特点,多项研究发现在应用于多种疾病的治疗[1-4]、促进机体自我修复等有良好前景和巨大的潜力。……