Afp-cre-lacZ转基因小鼠的构建

顾晓雯, 孙瑞林, 费 俭

(1. 同济大学生命科学与技术学院, 上海 200092; 2. 上海南方模式生物科技股份有限公司, 上海 201203)

Afp-cre-lacZ转基因小鼠的构建

顾晓雯1, 孙瑞林2, 费 俭1

(1. 同济大学生命科学与技术学院, 上海 200092; 2. 上海南方模式生物科技股份有限公司, 上海 201203)

目的 研究甲胎蛋白(Afp)阳性细胞的增殖分化在组织生长修复，肿瘤发生过程中的作用，建立Afp-CreERT转基因小鼠细胞示踪系统。方法 采用DNA雄原核显微注射方法获得Afp-CreERT转基因小鼠，筛选出合适的品系后，使之与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交，获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠。结果 显微注射后，共出生小鼠56只，经PCR鉴定Cre阳性小鼠共4只，阳性小鼠传代后各为一系。筛选内源性Afp表达与Cre表达相对符合的品系作为Afp-CreERT转基因小鼠品系建系。Afp-CreERT转基因小鼠与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交，经PCR鉴定后获得Cre/lacZ双阳性的Afp-cre-lacZ转基因小鼠。经实时PCR，X-gal染色，免疫荧光染色鉴定后得到Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统，同时证实该系统能够正确示踪Afp表达阳性的细胞，同时也能够应用于肝损伤小鼠模型中。 结论 成功构建了Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统，为研究这类细胞的谱系发生提供了工具。

甲胎蛋白(Afp); 转基因小鼠模型; 细胞示踪

甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, Afp)是由Afp基因编码的一种糖蛋白，属于血清白蛋白一类的蛋白家族。该蛋白于1956年自人类胚胎中首次被发现[1]。在胚胎发育过程中，Afp基因开放表达，并且合成具有重要功能的Afp[2]。但随着发育完成，Afp的表达量逐渐降低，出生2年后，血清中基本已经检测不到Afp[3,4]。成年以后的Afp的高表达往往与肿瘤密切相关[5]。……