硫化氢在外源性雷帕霉素预处理人结肠癌细胞增殖中的作用

李豫江 张 伟 陈志刚 黄桂林 赵 磊

(石河子大学医学院第一附属医院普外二科，新疆 石河子 832008)

硫化氢在外源性雷帕霉素预处理人结肠癌细胞增殖中的作用

李豫江 张 伟 陈志刚 黄桂林 赵 磊1

(石河子大学医学院第一附属医院普外二科，新疆 石河子 832008)

目的 探讨外源性硫氢化钠(NaHS)(H2S供体)对体外培养人结肠癌细胞增殖的影响及其机制。方法 体外培养人结肠癌细胞，随机分为正常对照组、NaHS(100 μmol/L)组、雷帕霉素(1 μg/ml)组、NaHS(100 μmol/L)+雷帕霉素(1 μg/ml)组，采用CCK-8检测各组干预48 h后对人结肠癌细胞增殖的影响，流式细胞术检测各组干预48 h后对人结肠癌细胞细胞周期的影响，Western印迹检测各组干预48 h后对人结肠癌细胞中mTOR蛋白表达的影响。结果 与正常对照组比较，NaHS组人结肠癌细胞增殖显著增加，G0/G1期细胞显著减少，S期细胞显著增加，mTOR蛋白表达均显著增加(P<0.01)。雷帕霉素组人结肠癌细胞增殖显著减少，G0/G1期细胞显著增加，S期细胞显著减少，mTOR蛋白表达均显著减少(P<0.01)。而与NaHS组比较，NaHS+雷帕霉素组人结肠癌细胞增殖显著减少，G0/G1期细胞显著增加，S期细胞显著减少，mTOR蛋白表达均显著减少(均P<0.01)。结论 PI3K/Akt/mTOR信号通路可能介导参与了H2S对人结肠癌细胞增殖的调控作用。

结肠癌细胞；硫化氢；细胞增殖；PI3K/Akt/mTOR信号通路

研究发现，一氧化氮(NO)参与了结肠癌的增殖和迁移〔1，2〕。而硫化氢(H2S)被认为是继NO和一氧化碳(CO)之后的第三种气体信号分子〔3〕。研究发现H2S可促进结肠癌细胞的增殖，但其具体机制尚不清楚〔4〕。研究证实：磷脂酰肌醇-3(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路是细胞存活、增殖及凋亡过程中较为关键的通路，该通路被持续激活可促进细胞增殖，抑制细胞凋亡〔5〕。为进一步深入探讨H2S对人结肠癌细胞增殖的作用机制，本实验在体外研究了 PI3K/Akt/mTOR 信号通路在H2S 影响人结肠癌细胞增殖的作用。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 人结肠癌细胞Caco-2(中科院上海细胞库)保持了正常人结肠癌细胞基本形态和生物学特性。……