色素上皮源性因子通过血管内皮生长因子抑制非小细胞肺癌的发生发展

周立霞，吴月明，李娜

（锦州医科大学附属第三医院肿瘤科，辽宁锦州121000）

色素上皮源性因子通过血管内皮生长因子抑制非小细胞肺癌的发生发展

周立霞，吴月明，李娜

（锦州医科大学附属第三医院肿瘤科，辽宁锦州121000）

目的检测A549中色素上皮源性因子（PEDF）通过血管内皮生长因子（VEGF）影响细胞的增殖与迁移的方式。方法过表达或沉默PEDF后观察其对VEGF的影响。MTT与trasnwell检测PEDF对细胞增殖和迁移的作用。实时PCR及Western blotting检测PEDF如何调节VEGF/SRC/FAK通路。结果PEDF可抑制VEGF，进而抑制A549细胞的增殖与迁移。结论PEDF可能成为肺癌的潜在诊疗靶点。

非小细胞肺癌；血管内皮生长因子；A549；色素上皮源性因子

肺癌被认为是目前全世界对人类健康与生命威胁最大的恶性肿瘤［1］。色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）是一种分泌型糖蛋白，在多种肿瘤中都存在表达下调的现象，主要功能为促进肿瘤细胞凋亡，抑制细胞增殖、侵袭转移和新生血管生成等［2-3］。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是具有旁分泌功能的生长因子，与实体肿瘤生长关系密切［4-6］。

本研究探讨了PEDF通过影响VEGF与其下游SRC/FAK通路调控A549细胞增殖与迁移的方式，以期待由此能找到诊疗非小细胞肺癌的新方法。

1 材料与方法

1.1 材料

人肺癌A549细胞株（实验室冻存），DMEM培养基（Hyclone公司，美国），胎牛血清（天津市灏洋生物制品科技有限责任公司），trizol、氯仿、异丙醇（上海生工生物工程股份有限公司）。抗体：PEDF，VEGF，SRC，SRCp-Tyr418，FAK，FAKp-Tyr397，cyclin D1，caspase 3，paxillin和GAPDH（Santa公司，美国），SYBR Green（Promega公司，美国）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养：用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养A549细胞至对数生长期。

1.2.2 MTT实验：分别将PEDF质粒或PEDF silence小链（吉凯，上海）转染到处于对数生长期的A549细胞中，培养24 h后，分别于0 h，12 h，24 h，36 h和48 h使用MTT方法测量细胞增殖情况，在490 nm处记录吸光值。……