王子雄,王勤章,钱彪
(石河子大学医学院附属第一医院,新疆石河子832000)
经尿道灌注SCL基因重组慢病毒的DCP豚鼠膀胱Cajal样间质细胞数量、分布及超微结构观察
王子雄,王勤章,钱彪
(石河子大学医学院附属第一医院,新疆石河子832000)
目的 观察经尿道灌注干细胞白血病(SCL)基因重组慢病毒的糖尿病膀胱病(DCP)豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICC)的数量、分布及超微结构变化。方法 构建SCL基因重组慢病毒且标定滴度。选择雄性豚鼠70只,单次腹腔注射链尿佐菌素12周后构建DCP豚鼠模型,将成功造模的27只豚鼠随机分为实验组、阳性对照组、空白对照组,每组9只。实验组、阳性对照组、空白对照组豚鼠分别经尿道灌注(转染)SCL基因重组慢病毒、空慢病毒和等量PBS液。分别于转染后7、14、28 d每组各处死3只豚鼠,取膀胱组织,制作切片,激光共聚焦显微镜下观察GFP表达、膀胱ICC数量及分布变化,透射电镜下观察膀胱ICC的超微结构变化。结果 实验组随转染时间延长,ICC数量逐渐增多(P均<0.01),分布越发密集,但绿色荧光逐渐减退;空白组和对照组未见绿色荧光,随转染时间延长,ICC数量逐渐减少(P均<0.05),分布稀疏;转染14、28 d时,实验组ICC数量较空白组和对照组增加(P均<0.01)。实验组随转染时间延长,ICC细胞器数量增多,形态趋于正常,细胞内空泡减少,胞周突起延长变多,ICC超微结构处于不断恢复之中;而阳性对照组和空白对照组ICC超微结构病理变化逐渐加重。结论 经尿道灌注SCL基因重组慢病毒转染DCP豚鼠膀胱后,膀胱ICC数量增多,分布更加密集,细胞超微结构得到修复,提示SCL基因对DCP可能有一定治疗效果。
干细胞白血病基因;Cajal样间质细胞;糖尿病膀胱病
糖尿病是严重危害人体健康的多发病及常见病[1]。糖尿病膀胱病(DCP)又称糖尿病神经源性膀胱(DNB),是糖尿病常见并发症之一,发生率为19%~84%[2],早期表现为尿频、尿急,后期表现为尿不尽、残余尿增多等膀胱功能失代偿征象[3]。糖尿病患者常因膀胱功能障碍、排尿异常导致生活质量严重下降[4]。目前,DCP的发病机制和治疗措施在不断探索之中。研究[5,6]发现,人类、豚鼠、小鼠、大鼠等多种动物的膀胱逼尿肌有一特殊间质细胞,形态与胃肠道Cajal样间质细胞(ICC)类似,称为膀胱ICC。……