慢病毒介导的FOXQ1过表达对人脐带间充质干细胞衰老的影响*

张 涛，王 攀，马珊珊，石振庆，程 康，黄团结，刘艳霞，杨 波，关方霞#

1)郑州大学生命科学学院 郑州 450001 2)郑州大学第一附属医院检验科；河南省检验医学重点实验室 郑州 450052 3)郑州大学第一附属医院神经外科 郑州 450052

慢病毒介导的FOXQ1过表达对人脐带间充质干细胞衰老的影响*

张 涛1)，王 攀2)#，马珊珊1)，石振庆1)，程 康1)，黄团结1)，刘艳霞1)，杨 波3)，关方霞1)#

1)郑州大学生命科学学院 郑州 450001 2)郑州大学第一附属医院检验科；河南省检验医学重点实验室 郑州 450052 3)郑州大学第一附属医院神经外科 郑州 450052

#通信作者，关方霞，女，1969年2月生，博士，教授，研究方向：干细胞与再生医学，E-mail：guanfangxia@126.com；王攀，男，1986年11月生，博士，助理研究员，研究方向：细胞衰老机制，E-mail：wpzzu2004@126.com

FOXQ1；过表达；慢病毒载体；人脐带间充质干细胞；衰老

目的：构建FOXQ1慢病毒载体，探究FOXQ1过表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)衰老的影响。方法：PCR扩增FOXQ1序列，构建慢病毒pHBLV-FOXQ1-Puro重组载体，包装病毒、感染hUC-MSCs(过表达组)，感染空载体病毒的hUC-MSCs为对照，分别采用实时荧光定量PCR、Western blot检测2组细胞FOXQ1 mRNA及蛋白的表达水平，采用CCK-8法检测细胞增殖能力的变化，采用SA-β-Gal与AP染色检测hUC-MSCs衰老表型。结果：慢病毒pHBLV-FOXQ1-Puro重组载体构建成功，病毒包装后感染hUC-MSCs效果良好。过表达组FOXQ1蛋白及mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05)。过表达组细胞增殖能力较强，FOXQ1过表达可以延缓hUC-MSCs衰老。结论：成功建立FOXQ1稳定过表达的hUC-MSCs细胞系，FOXQ1过表达可以延缓hUC-MSCs衰老。

叉头框(forkhead box,FOX)家族在胚胎发育、糖类和脂类代谢、细胞周期调控、细胞衰老、免疫调节等多种生物学过程中发挥重要作用[1]。FOXQ1是近年研究较多的FOX家族成员，目前发现其在多种肿瘤组织高表达，通过促进上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)[2]，增强癌细胞的增殖侵袭能力[3]。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)在体外培养过程中容易衰老，影响其进一步实验应用。……