基于ITS条形码的维药克孜力乔古鲁克药材的分子鉴定研究

马双双 王学勇 刘春生 肖瑶 赵保胜 张驰 李妍芃 王娟 田思敏 冯琼



·论著·

基于ITS条形码的维药克孜力乔古鲁克药材的分子鉴定研究

马双双 王学勇 刘春生 肖瑶 赵保胜 张驰 李妍芃 王娟 田思敏 冯琼

目的 对维药克孜力乔古鲁克药材(Paeoniaeradixhybridae，PRH)的品种进行精准鉴别，同时将其原植物块根芍药PaeoniahybridaPall.与窄叶芍药P.anomalaL.和新疆芍药P.sinjiangensisK.Y.Pan进行区分，为保证药材来源的准确性提供科学依据。 方法 提取块根芍药的DNA，基于内部转录间隔区的核糖体DNA序列(ITS)进行PCR引物扩增并测序，并从GenBank数据库下载块根芍药和其原变种窄叶芍药和近缘种新疆芍药的ITS序列，采用DNAMAN、Editseq、MeGA5等软件，计算块根芍药种间、种内的Kimura 2-parameter(K 2-P)遗传距离，寻找块根芍药的特异位点，并构建Neighbor-joining(N-J)系统聚类树。 结果 块根芍药G+C含量范围为55.82%～56.45%，与另外两个种G+C含量未重叠；所有样本ITS序列的K 2-P遗传距离范围为0～0.026，其中种间遗传距离分布为0.014～0.026，大于块根芍药种内遗传距离0.000～0.012；通过序列比对分析，发现块根芍药与另外2个种有6个特异位点；N-J系统聚类树也将19个样品聚为两个大支系，所有块根芍药聚为一支，有84%支持率，其中中国地区分布的块根芍药聚为一小支，俄罗斯地区分布的块根芍药亲缘关系较远。 结论 经过遗传距离、系统聚类、特异位点分析等系统研究发现ITS序列能区分块根芍药与其原变种窄叶芍药和近缘种新疆芍药，可以应用于维药PRH的精准鉴别，并且在变种与原变种的区分方面有很大潜力。

克孜力乔古鲁克； 块根芍药； 内转录间隔区； 遗传多样性；……