分子佐剂鞭毛素对弓形虫SAG1蛋白抗体应答的影响

黄驹辉, 龚丽贞, 唐静静, 黄志坚, 殷光文

(福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建 福州 350002)

分子佐剂鞭毛素对弓形虫SAG1蛋白抗体应答的影响

黄驹辉, 龚丽贞, 唐静静, 黄志坚, 殷光文

(福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建 福州 350002)

将沙门氏菌鞭毛素和弓形虫免疫优势表面抗原1(SAG1)融合表达，研究其在小鼠上激发的体液免疫应答.首先，采用PCR扩增SAG1片段.其次，将SAG1连接到原核表达载体pET-28a中构建表达质粒pET-28a-SAG1；连接到实验室已有的pET-28a鞭毛素质粒中构建表达质粒pET-28a-F-SAG1；质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中并进行表达.将纯化后的蛋白免疫小鼠，每隔2周免疫一次，共免疫3次，第3次免疫后15 d取小鼠血清.最后，采用蛋白印迹检测蛋白的大小；用酶联免疫吸附方法检测血清中多克隆抗体的效价.结果表明，诱导出的SAG1蛋白大小为30 ku，F-SAG1大小为70 ku.酶联免疫吸附方法检测的D450 nm均为阴性对照的两倍,表明该多克隆抗体具有较高效价.可见，鞭毛素可以作为分子佐剂促进弓形虫亚单位疫苗的体液免疫应答.

弓形虫; 表面抗原1(SAG1); 鞭毛素; 体液免疫

弓形虫是一种专性细胞内寄生的机会性致病原虫，可以感染包括人类在内的几乎所有的温血动物，是一种严重的人兽共患寄生虫病原[1].弓形虫病的传播与流行不仅给畜牧业生产和发展带来极大的经济损失[2]，还会引发严重的公共安全问题[3].孕妇感染弓形虫可导致流产，或新生儿免疫力低下而患先天性疾病[4]；……