探讨鸦胆子素 D 对骨肉瘤细胞增殖、凋亡与自噬的作用

郑颖 王刚阳 陈瑞玲 华莹奇 蔡郑东

. 临床研究与实践 Clinical research and practice .

探讨鸦胆子素 D 对骨肉瘤细胞增殖、凋亡与自噬的作用

郑颖 王刚阳 陈瑞玲 华莹奇 蔡郑东

目的探讨鸦胆子素 D 对骨肉瘤细胞 ( 143B HOS ) 增殖，骨肉瘤细胞凋亡与自噬的作用。方法用 CCK8 实验观察鸦胆子素 D 对 143B HOS 增殖的影响；用平板克隆实验观察鸦胆子素 D 对 143B HOS细胞集落形成的影响；用流式细胞仪检测鸦胆子素 D 对 143B HOS 周期阻滞以及诱导凋亡的作用情况；用Western Blot 检测 143B HOS 基础凋亡与自噬以及经鸦胆子素 D 诱导之后的凋亡与自噬情况；用荧光显微镜检测 143B 细胞基础 LC3 荧光鼬合蛋白表达以及经鸦胆子素 D 诱导之后的 LC3 荧光鼬合蛋白表达情况。结果( 1 ) CCK8 实验显示鸦胆子素 D 作用后 143B HOS 细胞的存活率下降，同时，也减少了 143B HOS 细胞克隆数的形成；( 2 ) 流式细胞仪检测细胞周期显示鸦胆子素 D 使 143B HOS 的 G0 / G1 期细胞比例增高；( 3 ) 流式细胞仪检测细胞凋亡实验显示，鸦胆子素 D 使 143B HOS 的细胞凋亡比例增加；Western Blot 检测 143B HOS 细胞Cleaved PARP 的表达，结果显示，鸦胆子素 D 诱导 Cleaved PARP 表达增加；( 4 ) Western Blot 检测 143B HOS细胞 LC3B 的表达，结果显示，鸦胆子素 D 诱导 LC3B-II 的表达增加；荧光显微镜检测 143B 细胞的 LC3 荧光鼬合蛋白实验，结果显示，鸦胆子素 D 诱导 143B 细胞绿色荧光斑点生成增多。结论( 1 ) 鸦胆子素 D 抑制骨肉瘤细胞增殖；( 2 ) 鸦胆子素 D 诱导骨肉瘤细胞的凋亡；( 3 ) 鸦胆子素 D 诱导骨肉瘤细胞自噬。

骨肉瘤；鸦胆子素；细胞增殖；细胞凋亡；自噬

骨肉瘤是临床最常见的原发性恶性骨肿瘤，以10～20 岁青少年发病居多。据统计，每年每 100 万0～20 岁的人群中就有约 4～5 人发病[1]。……