硅羟基磁珠的制备及全基因组DNA提取优化

李海洋王飞雷红涛张璇2，陈珂

（1. 西南科技大学生命科学与工程学院，绵阳 621000；2. 广东顺德创新设计研究院，佛山 528000；3. 广东省食品质量安全重点实验室 农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评价实验室 华南农业大学食品学院，广州 510642）

硅羟基磁珠的制备及全基因组DNA提取优化

李海洋1王飞1雷红涛3张璇2，3陈珂1

（1. 西南科技大学生命科学与工程学院，绵阳 621000；2. 广东顺德创新设计研究院，佛山 528000；3. 广东省食品质量安全重点实验室 农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评价实验室 华南农业大学食品学院，广州 510642）

旨在制备硅羟基功能化纳米磁珠与核酸提取试剂，并对提取过程进行优化。采用溶剂热法制备硅羟基功能化纳米磁珠，并用表面化学修饰法在磁珠表面包裹SiO2；在自制磁珠提取过程中分别对比缓冲液浓度、裂解液浓度、磁珠量以及洗脱温度等因素对DNA提取效率的影响，使用紫外分光光度计定量测定和琼脂糖凝胶电泳定性验证，并与商品化磁珠试剂盒提取效果进行对比。结果显示，通过水热法成功合成了粒径在200 nm左右的Fe3O4@SiO2磁珠，当磁珠量为1.5 mg，裂解液为含5 mol/L的盐酸胍溶液（pH4.9），缓冲液体系为含60%无水乙醇的60 mmol/L盐酸胍缓冲液（pH7.5），洗脱温度为65℃时，所提取的核酸效果达到最优，且4个因素对浓度的影响均存在统计学差异（P＜0.05）。利用自制磁珠和试剂体系可高效的完成全血中全基因组DNA的提取，且优于商业化试剂盒。

纳米磁珠；表面修饰；全基因组DNA提取

随着分子生物学的快速发展，基因组水平研究已经成为热点。……