血性胸水细胞蜡块制作的体会

林 旭,周 强

(南京大学附属鼓楼医院病理科，江苏 南京 210008)

临床细胞病理工作中，常规的胸水涂片因制作简单、可快速进行诊断在临床应用普及。但是日常工作中，胸水涂片经常因细胞形态结构不典型、细胞蜕变、或与增生间皮细胞不易区分等因素，细胞病理学并不能有明确的诊断结果[1]。通过制作细胞蜡块，进行免疫组织化学方法鉴别，才能使细胞病理诊断精准化。然而，细胞蜡块的制作要求严格，特别是血性胸水，如果标本前期血细胞处理不好，含血量多，就会影响细胞蜡块制作、导致常规石蜡切片严重掉片，从而无法进行更深层次检测诊断。本实验欲研究一种方便快捷的方法，提高血性胸水细胞蜡块的制作质量，从而方便免疫组织化学、分子等检测，使细胞病理诊断趋于精准化。

1 资料与方法

1.1 一般资料

南京大学附属鼓楼医院病理科2013—2015年临床2 h内送检新鲜血性胸水20例，容量大于200 mL。

1.2 试剂

95%乙醇、PreservCyt细胞清洗液(Hologic ,Inc.)、冰醋酸、试管、全自动脱水机(SAKURA)、包埋机(SAKURA)、全自动染色机(Dako CoverStainer)、切片机(Leica)、离心机、振荡器。

1.3 方法

2 h内送检新鲜血性胸水样本，混合均匀后倒入2支试管并配平,2000 r/min离心5 min，弃上清后再倒入混匀样本2 000r/min离心5min，反复多次至标本全部离心完；弃上清、吸取中间层细胞入干净试管，加入20 mL混合液(PreservCyt细胞清洗液与冰醋酸9∶1配比)振荡10 min，2000 r/min离心5 min后弃上清(如果标本含血细胞多，可重复此步骤一次)，将沉淀物平均分成3份，加入20 mL 95%乙醇2 000 r/min离心5 min，分别静置2 h、4 h、过夜等不同时间固定细胞；固定完成后弃上清(95%乙醇)，用擦镜纸将沉淀物包好后放入包埋盒，经全自动脱水机脱水、包埋、常规切片(2 μm)、全自动染色封片机HE 染色封片，镜下观察。……