利用实时荧光PCR快速筛查玉米中转基因成分

张海波, 刘 冰, 杨娟妮, 张 田, 张 英

(1.陕西省种子管理站，西安 710018；2.农业部农作物种子质量监督检验测试中心，西安 710018)

利用实时荧光PCR快速筛查玉米中转基因成分

张海波1,2, 刘 冰1,2, 杨娟妮1,2, 张 田1,2, 张 英1,2

(1.陕西省种子管理站，西安 710018；2.农业部农作物种子质量监督检验测试中心，西安 710018)

玉米是拥有转基因转化体数量最多的作物，多样的转化体增加了玉米中转基因成分筛查的难度。为了建立玉米中转基因成分的快速筛查方法，利用Taqman探针实时荧光PCR方法，通过对玉米样品中CaMV35S启动子(P-35S)和NOS终止子(T-NOS)2个元件组合的检测，完成对现有玉米转化体的筛查。建立的Taqman探针实时荧光PCR方法灵敏度可达到0.1%，检测时间较普通PCR方法缩短1 h以上。同时提出了转基因玉米转化体鉴定路线图。该筛查方法可对玉米中的转基因成分进行快速、高灵敏度的筛查。

转基因玉米；Taqman探针实时荧光PCR；快速筛查；CaMV35S启动子

随着转基因植物及其产品越来越受到消费者关注，快速、准确的转基因成分筛查方法，将成为维护消费者权益的重要技术支撑。以PCR 技术为基础的方法是转基因成分检测中最为快速和准确的方法[1]。常规PCR检测由核酸提取、PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳3个步骤组成。Taqman探针实时荧光PCR技术近年来越来越多的应用于转基因成分检测中，它是在常规PCR基础上，添加一条标记2个荧光基团的探针(Taqman探针)，能在PCR扩增过程中，通过记录荧光信号强度的变化，对扩增产物的积累进行实时监控，从而能在扩增结束时对结果进行判断[2]。……