加得拉·吐留汗,倪志勇,邱迎风,曲延英,陈全家
(新疆农业大学 农学院,农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐 830052)
海岛棉GbHCT基因的表达分析
加得拉·吐留汗,倪志勇,邱迎风,曲延英,陈全家
(新疆农业大学 农学院,农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐 830052)
通过海岛棉基因组数据库和GSDS 2.0在线生物信息学软件,分析GbHCT基因的结构,利用实时荧光定量PCR技术,检测GbHCT基因在海岛棉不同组织和棉纤维不同发育时间的表达量。结果表明,该基因DNA序列长度为1 953 bp,开放阅读框长度为1 311 bp,编码436个氨基酸,在海岛棉基因组中对应scaffold3453序列,含有1个内含子和2个外显子。GbHCT基因在不同组织和纤维发育不同时期中均有表达,在各个组织中,苞叶和花中表达量最高,在棉纤维不同发育时期开花后5 d和25 d表达量最强。该基因可能参与棉纤维发育伸长期和次生壁增厚期。为深入研究该基因的功能,构建植物表达载体pEGAD-GbHCT并转入根癌农杆菌,为下一步研究奠定试验基础。
海岛棉;GbHCT;棉花纤维基因表达;植物表达载体
木质素(lignin)是自然界中仅次于纤维素的大分子物质,是植物细胞壁的重要组成成分[1]。主要由对-羟基苯基木质素(p-hydroxyphenyl lignin,H木质素)、愈创木基木质素(guaiacyl lignin,G木质素)和紫丁香基木质素(syringyl lignin,S木质素) 3种单体分别聚合形成[2]。莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(shikimate/quinatehydroxycinnamoyltransferase,HCT)是木质素生物合成途径中控制木质素G/S-单体生物合成的关键限速酶,该酶通过调节木质素H-单体与G/S-单体的生物转化从而达到调控植物体木质素单体组成[3-4]。Hoffmann等[5]从烟草茎的抽提物中克隆HCT基因,葛文雅等[6]和王雪霞等[7]在拟南芥、烟草、大麦、毛果杨、黄瓜、高粱、玉米等植物中得到HCT基因。……