张凤兰,杨璐军,朱红梅,张南炀,沙学芳,朱柯颖,肖志成,5*
(1.昆明医科大学分子临床医学研究院,云南省干细胞和再生医学重点实验室,昆明 650500; 2.深圳市宝安区人民医院,深圳 518101; 3.南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室,广州 510282;4.昆明医科大学基础医学院,昆明 650500; 5.澳大利亚莫纳什大学免疫与干细胞研究中心,墨尔本VIC3010)
不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究
张凤兰1,杨璐军2,3,朱红梅1,张南炀1,沙学芳4,朱柯颖4,肖志成1,5*
(1.昆明医科大学分子临床医学研究院,云南省干细胞和再生医学重点实验室,昆明 650500; 2.深圳市宝安区人民医院,深圳 518101; 3.南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室,广州 510282;4.昆明医科大学基础医学院,昆明 650500; 5.澳大利亚莫纳什大学免疫与干细胞研究中心,墨尔本VIC3010)
目的 详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法 分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18 d)和大脑皮层(胎龄14、16 和18 d)组织,消化成单细胞悬液,贴壁培养3 ~ 4 h,细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin,统计分析各组中NSCs所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果 细胞免疫荧光结果显示,分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高,为53.42% ± 1.57%;……