李丹 罗怡 卢奕
·基础研究·
紫外线C诱导的人晶状体上皮细胞中CRYAA表达的上升△
李丹 罗怡*卢奕*
目的 研究在紫外线照射下人晶状体上皮细胞(LEC)中晶状体蛋白的表达变化。方法 用波长为254 nm的紫外线C(UVC)照射LEC(包括原代细胞和细胞系),一定时间后收集照射后的细胞进行如下实验:①碘化丙啶(PI)染色和线粒体膜电位流式检测对细胞进行凋亡评估;②实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CYRAA,CRYAB,CRYBB2基因的mRNA表达量;③免疫荧光染色检测CRYAA的蛋白表达;④焦磷酸测序检测CRYAA基因的启动子区域甲基化。结果 LEC在强度为25 μW/cm2的UVC照射0、10、20、30 min后立即做PI染色,结果显示:随着照射时间的增加,细胞凋亡率递增,分别为0、7%、33%和100%。LEC在UVC照射10 s并培养24 h后100%死亡;照射5 s并培养24 h后,部分凋亡,CRYAA基因表达量显著上调(>4倍),但是细胞传代后CRYAA基因表达量恢复正常水平。焦磷酸测序结果显示,CRYAA基因的启动子区甲基化水平无明显变化。结论 LEC在受到强度为25 μW/cm2的UVC照射10 s并继续培养24 h后死亡,照射5 s并继续培养24 h后,CRYAA基因表达上调,提示其抗氧化作用,但该上调不是通过CRYAA基因启动子甲基化改变来调控的。(中国眼耳鼻喉科杂志,2017,17:239-244)
白内障;紫外线;CRYAA;细胞凋亡
白内障被定义为晶状体浑浊,在全球范围内约有1 600万患者,是主要的致盲眼病[1]。现在普遍认为白内障是随着年龄老化自然发生的,平均在50岁开始发病。同时,若干其他因素也会影响、加速白内障的发生、发展,包括家族遗传、眼外伤、糖尿病、眼部炎症、长时间暴露在紫外线(ultraviolet,UV)下等因素。已经被普遍认同的是:长期在可接触UV环境下工作的人(不论UV是来自于太阳光,还是消毒灯),患白内障的年龄会比平均年龄提前。这……