细胞穿透肽4介导的Cu/Zn SOD对缺氧复氧损伤心肌细胞的影响*

王 宇，李 清，曾文静，陈靖宜，刘菊英

(十堰市太和医院/湖北医药学院附属医院麻醉科，湖北十堰 442000)



·论 著·

细胞穿透肽4介导的Cu/Zn SOD对缺氧复氧损伤心肌细胞的影响*

王 宇，李 清，曾文静，陈靖宜，刘菊英△

(十堰市太和医院/湖北医药学院附属医院麻醉科，湖北十堰 442000)

目的 评价细胞穿透肽4(又称为蛋白转导结构域4，PTD4)介导的铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤(HRI)的影响。方法 用厌氧培养箱[85%氮气(N2)，10%氢气(H2)，5% CO2]制作大鼠心肌细胞(H9c2)HRI模型，设置HRI组(HRI的细胞培养液中不加任何处理因素)，HRI+Cu/Zn SOD组(加入10 μmol/L Cu/Zn SOD)、HRI+PTD4-Cu/Zn SOD组(加入10 μmol/L PTD4-Cu/Zn SOD)，另外以正常培养心肌细胞作为正常对照组，孵育30 min后，透射电镜观察心肌线粒体超微结构，JC-1试剂盒检测线粒体膜电位，末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测心肌细胞凋亡。结果 PTD4-Cu/Zn SOD组线粒体损伤程度较HRI组有明显改善。与正常对照组比较，HRI组线粒体膜电位明显下降，PTD4-Cu/Zn SOD组线粒体膜电位低于正常对照组，但与HRI组比较明显恢复。HRI+PTD4-Cu/Zn SOD组心肌细胞凋亡指数[(10.20±2.77)%]较HRI组[(28.40±2.41)%]明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PTD4介导的Cu/Zn SOD可以减轻大鼠心肌细胞的HRI。

超氧化物歧化酶；细胞穿透肽；缺氧；损伤；心肌

研究发现心肌缺血再灌注损伤的发病机制反映了复合通路的汇集，包括氧自由基、离子通道、炎性反应和内皮功能障碍等，其中再灌注后初始几分钟内氧自由基大量产生及钙超载最为显著[1]。铜锌超氧化物歧化酶(Gu/Zn superoxide dismutase，Gu/Zn SOD)是一种特异性内源性自由基清除剂，在清除机体氧自由基(ROS)的抗氧化反应过程中最早发挥作用[2]。但是，由于Gu/Zn SOD在哺乳动物细胞膜上没有专一受体或通道，外源性的Gu/Zn SOD很难进入细胞和组织内发挥生物学作用。……