LPS诱导THP—1细胞释放蛋白表达的调节

欧明涛 邓玉冉 彭兴辉

摘要：目的：探讨LPS诱导THP-1细胞释放蛋白表达的调节。方法：LPS（1 μg/ml）诱导不同时间后，THP-1细胞上清液中蛋白含量变化及不同浓度LPS诱导THP-1细胞释放蛋白的表达和NF-κB的活性，LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白核转位变化。结果：LPS 组TNF-α 的含量均显著低于 LPS 组，处理LPS诱导THP-1细胞细胞上清液NF-κB的活性表达量呈明显下降趋势。结论：LPS可诱导 THP-1细胞TNF-α表达增多及NF-κB活化，导致蛋白表达增多及核转位，能抑制THP-1细胞TNF-α表达及NF-κB活化，调节蛋白的表达及核转位。

关键词：LPS；THP-1细胞；NF-κB（P-65）；核转位

前言

HMGB1为高迁移率族蛋白（high mobility group protein，HMGB1）为细胞核内蛋白，主要参与DNA复制、转录稳定核小体结构等作用[1，2]。HMGB1也是一种在脓毒症晚期引起多器官衰竭的重要炎性介质，其自身毒性和结合促炎因子相互作用是参与和加重脓毒症晚期器官衰竭的病理生理过程，从而介导了内毒素致死效应[3，4]。中药银杏叶提取物（extract of Ginkgobiloba，EGb761）是从银杏叶中提取的天然活性物质，其主要有效成分为黄酮糖苷类（24 %）和菇烯内醋类（6 %），EGb761是一类纯天然抗氧化剂，调节多种抗氧化酶活性，具有抗炎、抗癌、抑制血小板聚集、抗衰老等多种药理活性。已有研究表明EGb761对早期炎症因子TNF-α的抑制作用，在觀察银杏叶提取物EGb761对LPS诱导THP-1细胞释放HMGB1蛋白表达的调节。

材料与方法：脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）；银杏叶标准提取物EGb761，THP-1，HMGB1抗体、核因子KBp65 抗体及辣根过氧化物酶标山羊抗鼠IgG 为Sigma产品。IL-1 β、IL-6 、TNF-α检测试剂盒。THP1 细胞培养，检测炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达，检测NF-κB的活化、检测不同时间点HMGB1蛋白的表达，检测不同浓度EGb761对HMGB1表达的影响，各组数据采用均数±标准差（mean ± SD）表示并应用统计学软件SPSS13.0进行处理。……