西宁及海东地区规模猪场猪链球菌型抗体调查

猪链球菌是一种人畜共患的急性，热性，败血性传染病，现在已经成为规模化养猪场中最常见的细菌性疾病之一，主要病原体为2型猪链球菌。该病在临床上可表现为败血症型、脑膜炎型、关节炎型、淋巴结脓肿型等多种类型。本次调查通过对西宁及海东地区9个规模猪场进行采样，血清学检测，初步掌握了猪链球菌2型感染情况，现将检测情况总结如下。

一、材料与方法

1.材料

（1）血样。共采集血样592份，来自湟源成农生猪养殖有限公司，宏源仔猪繁育合作社，互助八眉猪原种繁育场，互助恒丰养殖场，大通桦林德隆仔猪繁育场，大通县种猪场，乐都容生生态养殖有限公司，樂都福乐牧业有限公司，乐都丰源仔猪繁育有限公司，共计9个规模养猪场，分离血清-20℃保存备用。

（2）试剂。猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒，试剂生产厂家为武汉科前生物，试剂批号120903。

2.方法

（1）试验方法。

① 洗涤液配制 。使用前，浓缩的洗涤液恢复至室温（20-25℃），并摇动使沉淀溶解，用蒸馏水作20倍稀释，，混匀。

②样品稀释液配制。 将2.5g脱脂奶粉溶于50ml稀释液瓶中，作为待检血清和对照血清的稀释液。

③待检血清和对照稀释。 将待检血清在血清稀释板中用样品稀释液按1：40的比例稀释，阳性和阴性对照用样品稀释液按1：4稀释。

④取抗原包被板，先用稀释好的洗涤液洗版2次，再将稀释好的待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清各取100ul加入到抗原包被板孔中。阴性对照和阳性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30分钟。……