HPLC法测定玉米中的玉米赤霉烯酮含量

刘畅

摘 要：玉米赤霉烯酮又称F-2毒素、ZEA，主要会污染玉米、小麦、大麦、小米、大米和燕麦等谷物。本文主要通过对国标检测方法的优化，对浓缩重溶等方式建立分析方法，保证了上机检测浓度，提高了检测效率，使回收率和精密度均满足国标GB/T 27404-2008的要求。

关键词：玉米赤霉烯酮 玉米 高效液相色谱法

玉米赤霉烯酮又称F-2毒素、ZEA，主要会污染玉米、小麦、大麦、小米、大米和燕麦等谷物。ZEA具有和雌激素类似的结构，可与雌激素受体结合，发挥雌激素效应，其作用强度为雌激素的十分之一。ZEA可引起卵巢病变，干扰动物排卵、延长发情间期、减少胎仔数或引起不孕等[1]。

我国规定谷物及其制品中的玉米赤霉烯酮限量指标为小于等于60μg/kg[2]，一般采用液相色谱、气相色谱和试剂盒等方法进行检测。

本文通过对国家标准GB 5009.209-2016[3]/第一法进行优化，分别对方法检出限浓度、定量限浓度、限量指标浓度等进行加标实验，结果表明，用HPLC法进行ZEA质量浓度的测定，回收率和精密度均满足GB/T 27404-2008[4]的要求。

1 试剂和材料

超纯水、乙腈（色谱级）、甲醇（色谱级）、ZEA标准物质（PriboLab）、提取液（乙腈：水=84：16，v/v）[5]、PBS缓冲液（Hyclone）、吐温-20、ZEA免疫亲和柱（Romer）。

2 仪器

安捷伦1100高效液相色谱仪、荧光检测器、离心机、氮吹仪。

3 标准溶液

3.1 标准储备液：准确称取适量的标准品（精确至0.0001g），用乙腈溶解，配制成浓度为100μg/mL的標准储备液，-18℃以下避光保存。

3.2 标准工作液：用流动相稀释，配制成10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL的系列标准工作液，4℃避光保存。

4 实验方法

4.1 提取

本次实验采用市售玉米碴，经过高速粉碎机粉碎后，准确称取5g（0.001g）放于50mL离心管中，加入20mL提取液，涡旋振荡2min后，置于离心机中，8000rpm离心10min。……