脾气虚大鼠焦虑样行为及其初步机制研究

刘文俊　柴纪严　谢鑫

[摘要]目的 研究脾气虚大鼠焦虑程度的变化并探讨其可能机制。方法 选取雄性SD大鼠16只，体质量（200±10）g，将其随机分为对照组和脾气虚组（模型组），每组8只。旷场实验评价大鼠焦虑程度；ELISA法测定海马组织ATP和缩胆囊素-8（CCK-8）含量；免疫组化法检测海马CCKB型受体（CCKBR）表達。结果 与对照组比较，模型组的焦虑程度显著降低（P<0.01），海马组织的ATP含量降低（P<0.05），海马CCK-8水平变化不明显（P>0.05），但其受体表达下降（P<0.05）。结论 脾气虚时焦虑程度下降，其初步机制与海马能量不足和CCKBR表达减少有关。

[关键词]脾气虚；焦虑；缩胆囊素-8；缩胆囊素B受体；ATP

[中图分类号] R332 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）07（b）-0004-03

[Abstract]Objective To study the anxiety degree change of rats in spleen qi deficiency rat and discuss its initial mechanism.Methods 16 male SD rats with the body mass of （200±10）g were selected and they were randomly divided into the control group and spleen qi deficiency group （model group），and there were 8 rats in each group.Open-field test （OFT） was used to evaluate anxiety degree of rats.ELISA was chosen to measure ATP and CCK-8 concentrations in hippocampal tissue.Immunohistrochemical method was used to check CCKBR expression in hippocampal tissue.Results Compared with those in the control group，rat′s anxiety was reduced （P<0.01），hippocampal ATP level was decreased （P<0.05），hippocampal CCK-8 concentration was unchanged （P>0.05），hippocampal CCKBR expression was decreased （P<0.05） in the model group.Conclusion Anxiety in spleen qi deficiency is lower and its initial mechanism might involve in decrease of hippocampal ATP level and CCKR expression.

[Key words]Spleen qi deficiency；Anxiety；Cholecystokinin-8；CCKB receptor；ATP

焦虑是机体在适应新环境过程中所表现出的一种基本情绪，具有一定的趋避性，适度焦虑具有保护意义。研究发现，海马缩胆囊素（cholecystokinin，CCK）及其B型受体（CCK B receptor，CCKBR）与焦虑的形成关系密切[1-4]。中医将焦虑归属神志范畴，由心所主，但也依赖于脾主运化的功能，因为神志受气血供养，而脾为气血生化之源，如果脾气不足，则神失所养，焦虑程度势必受到影响，但目前没有相关报道。本研究首先观察脾气虚状态下大鼠的焦虑样行为变化，进而围绕海马CCK及其受体表达探讨其发生机制。

1材料与方法

1.1实验动物与分组

选取SPF级雄性SD大鼠16只，体质量（200±10）g，购于本溪实验动物中心[许可证号：SCXK（辽）-2010-0001]，随机分为对照组和脾气虚组（模型组），每组8只。大鼠饲养于辽宁中医药大学实验动物中心[许可证号：SYXK（辽）-2013-000-9]，自由饮水进食，18～23℃，相对湿度45%～55%。适应性饲养1周后开始实验。

1.2脾气虚模型的复制方法及评价标准

模型组大鼠按文献[5-6]方法复制和评价脾气虚证模型，即15 d内给予饥饱失常刺激（饱食1 d+禁食2 d，共5个循环），同时每日水温35～37℃游泳至力竭，以大鼠出现消瘦、食少、神疲和乏力等表现为模型复制成功。……